慢性心房颤动患者血清及心肌热休克蛋白27-60-70表达及其意义.docVIP

慢性心房颤动患者血清及心肌热休克蛋白27/60/70表达及其意义[摘要]目的 探讨慢性心房颤动患者血清及心肌中热休克蛋白(HSP)的表达及其意义。方法选取瓣膜置换手术患者40例，其中20例为房颤持续时间超过36个月，另20例为窦性心律，以ELISA法检测血清HSP27/60/70含量，以Western斑点印迹法检测右心房心肌组织中HSP27/60/70的表达水平。结果（1）两组患者血清中HSP27/60/70含量比较差异无统计学意义（P0.05）。（2）两组心肌组织中均见HSP27表达，但表达水平比较差异无统计学意义（P?0.05）。（3）慢性房颤组心肌中HSP70表达与窦性心律组比较差异有统计学意义（861.02±246.77 vs 1 068.51±332.18，P0.05). (3) Compared with SR, the AF group had higher level of HSP 60(5 965.03±1 564.92 vs 3 159.80±1 055.41, P36个月者，其中行二尖瓣置换术8例、主动脉瓣置换术6例、二尖瓣加主动脉瓣置换术6例；窦性心律（SR）组选取20例，其中行二尖瓣置换术10例、主动脉瓣置换术6例、二尖瓣加主动脉瓣置换术4例。两组患者年龄及性别比较差异无统计学意义(P?0.05)，右房直径（RAD）、左房直径(LAD)及左心室舒张末期直径（LVDd ）均AF组大于SR组（均P＜?0.01),射血分数(EF) SR组大于AF组(P＜0.01)。见表1。所有患者的瓣膜术后均送检，病理检查结果符合风湿性瓣膜病变表现。 1.2 标本留取及保存? 所有患者入院时抽取静脉血10?ml,离心后取血清保存于-20?℃冰箱备用。组织标本于手术进行到体外循环开始前，取右心耳组织,立即置-70?℃液氮保存。? 1.3 实验方法? 用ELISA法检测血清HSP27/60/70, 试剂盒均为美国ADL公司产品，实验步骤按说明书进行操作。用Western斑点印迹法检测心肌中HSP27/60/70，检测方法按参考文献[4]。? 1.4 数据统计及比较? 所有的定量数据均用x-±s表示，采用SPSS11.5软件进行统计学处理，组间数据比较采用t检验。? 2 结果? 2.1 两组患者血清中HSP27/60/70含量测定? 见表2。两组患者血清中HSP27/60/70含量比较差异均无统计学意义(P0.05)。? 2.2 两组患者心肌中HSP27/60/70含量测定? 两组患者心肌组织中HSP27表达未见明显统计学差异(P0.05)；HSP70表达水平AF组含量明显低于SR组(P?0.05)，和Mandal等[6]观察结果相符，故目前认为血清中HSP27/60/70和慢性房颤发生关系不大。? 本研究结果显示两组患者心肌组织中HSP27表达差异未见统计学意义(P0.05)。HSP27 是smHSP亚家族中的重要一员，Yang等〔15〕研究结果提示特发性房颤组患者心肌中HSP27表达较另两组增高。Kampinga等[16]认为HSP27可抑制房颤的持续发作，Brundel等[17]研究提示特发性房颤组患者心肌中HSP27表达较另两组增高，故目前认为HSP27能够抑制特发性房颤向持续性房颤转化，但对已经形成的慢性持续性房颤无特殊抑制作用。HSP27对心肌细胞的保护机制主要包括：(1)促进GSH 生成,提高细胞内还原能力; (2)抑制细胞色素C (CytC) 释放和Cyt C 凋亡蛋白酶激活因子1复合物形成; (3)抑制caspase 前体活化; (4)稳定细胞骨架。? 本研究结果提示患者右心房心肌组织中HSP70表达AF组低于SR组，差异有统计学意义(P?0.05)。HSP70是相对分子质量约为70 000的热休克蛋白。Rammos等[18-19]观察到HSP70在心肌中高表达患者房颤发生率低。风湿性心脏瓣膜病变导致免疫系统应激，引起心肌细胞HSP70含量增加。目前认为房颤发生和自我持续的核心环节包括心房电重构、收缩功能重构和结构重构 [1,19-20]，而HSP70在心肌中表达可维持心房肌细胞的正常形态结构从而抑制慢性房颤发生及持续[2-5]。其作用机制主要包括：（1）参与离子通道修复、恢复氧化还原平衡、阻止凋亡途径启动；（2）稳定细胞膜和溶酶体膜，防止蛋白质变性；（3）促进变性蛋白质的复性水解，维持蛋白质结构，从而保护细胞；（4）作为分子伴侣保护MnSOD和CAT等细胞内的抗氧自由基酶免受损伤；（5）抑制细胞因子的炎症反应，起非特异免疫保护作用。? 本研究结果提示两组患者心肌中HSP60表达差异有统计学意义(P0.05)，AF组含量明显