微生物与健康2012.09.21.pptVIP

一. 遗传的物质基础 核酸是一切生物遗传变异的物质基础。 DNA的结构 DNA是由四种核苷酸组成。即：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）。 四种核苷酸的差异仅仅在于碱基的不同。每个核苷酸均含有环状碱基、脱氧核酸和磷酸根三种组分。 DNA分子是由许多核苷酸连接在一起形成的多核苷酸长链。这条长链是双螺旋结构。即两条成对的，方向相反的，细长的多核苷酸链，彼此以一定的空间距离，在同一轴上互相盘旋而形成的一个双螺旋式扶梯，每条链均有脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖-磷酸交替排列构成的。 RNA的结构 RNA的结构与DNA的结构相似，只是尿嘧啶（U）代替了胸腺嘧啶（T）。 核酸的复制 半保留复制：复制后的DNA分子，各由一条新链和一条旧链构成双螺旋结构。 三个经典实验：证明核酸是微生物遗传物质 （1）转化实验： （2）噬菌体感染实验 （3）病毒的拆开和重组实验 转化实验 1928年，Griffith 发现肺炎双球菌间的转化现象。1944年 Avery证明转化本质是DNA。 实验材料：肺炎链球菌 肺炎链球菌 RII（Rough) : 粗糙型菌落，不致病 SIII(Smooth)：光滑型菌落，致病 1928年，Griffith的转化实验 R型菌 (无毒） S型菌（有毒） 加热杀死 S型菌 R型菌 （无毒）+加热杀死S型 + 怎么来的呢？ ？ 活的无毒（R）型细菌受到了死的有毒（S）型细菌的影响，转化为有毒（S）型 合理的解释： 1944年，Avery的转化实验 从上述结果中可知,只有S型细菌的DNA才能将肺炎链球菌的R型转化为S型。而且,DNA纯度越高,转化效率也越高。只取微量纯DNA(6×10-8g),仍有转化能力。 这就说明,S型菌株转移给R型菌株的,决不是某一遗传性状(如荚膜多糖)本身,而是以DNA为物质基础的遗传因子。 二. 基因突变和诱变育种 变异 基因突变 基因重组 诱变 自发突变 点突变 染色体畸变 碱基置换 移码突变 转换 颠换 缺失 添加 易位 倒位 缺失 添加 野生菌株(红色) 缺陷型菌株 (灰白色) 每一细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。 如突变为10-8，即表示在1亿次分裂过程中，会发生1次突变。 突变率: 1.基因突变 生物体内遗传物质的分子结构突然发生可遗传的变化。 不对应性：引起突变的因素和突变出的性状没有对应关系。 自发性：自然状况下也可发生。 稀有性：10-6-10-9间。 独立性：突变的发生一般是独立的。 诱变性：采用某种方法、药品可使突变率增加。 稳定性：新产生的性状是稳定的、可遗传的。 可逆性：既可发生正向突变，也可发生回复突变。 突变的特点: 2.突变与育种 自发突变与育种 在自然界发生的称为自发突变。 生产中选育 定向培育 诱变育种: 人为地在实验室采用某种物理或化学因素 诱发微生物的突变称为诱变。 诱变育种是指利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,在促进其突变频率显著提高的基础上，从中挑选少数符合目的的突变株，以供科学实验或生产实践使用。 在日常生产中微生物会以一定频率发生自发突变。此时可以抓住良机选育优良的生产菌种。 用某一特定环境长期处理某一微生物培养物，同时不断对它们进行移种传代，是达到积累和选择合适的自发突变体的一种古老的育种方法。培育新种的过程十分缓慢。 诱 变 剂 目前在实践上常用的诱变剂主要有： 紫外线 氮芥 硫酸二乙酯 N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（NTG或MNNG） 亚硝基甲基脲（NMU） 后两种因为有突出的诱变效果，所以被誉为“超诱变剂”。 诱变育种的步骤 原始菌种 纯化 斜面/肉汤培养 单孢子/单细胞悬液 诱变剂处理 平板分离 移至斜面 小试 中试 初筛 复筛 计算存活率 观察形态变异，挑单菌落 良种保藏 原菌种特性鉴定 特点及效果 提高菌株的生产能力； 改进产品质量； 扩大品种、简化生产工艺； 速度快、方法简便、收效显著。 1945 时间 1943 1943 1943 1947 1955 1971 1977 目前 发酵单位(U) 100 250 500 ～850 ～850 ～8000 ～2万 ～5万 6～12万 效价：指有效成分的浓度；1667ug/ml称为1 单位(U)。 青霉素产量与 诱变育种 三.几种育种技术的介绍 原生质体融合技术 有两株微生物菌株，各在某一方面有明显优势，如何把这两株的优势集中在一株上？ 利用原生质体融合技术 需要解决的难点： 去除微生物细胞膜外的细胞壁，得到原生质体。 原生质体