器官发生.ppt

五、附肢发育时期轴的建立 脊椎动物完全形成的附肢包含三个轴的发育：近远轴（proximal-distal, P-D）、背腹轴（dorsal-ventral，D-V）和前后轴（anterior-posterior, A-P）。 附肢发育中三个轴的建立具有各自的时间性，它们好像是按下列顺序决定的：前后轴、背腹轴和近远轴。 1. 近远轴的发育 附肢沿近远轴的分化是由AER和附肢中胚层诱导的相互作用产生的。附肢芽的逐渐向外生长是由于位于AER下面间质细胞的增殖，而AER释放的分子维持间质细胞不断进行分裂。 由AER合成、释放到其下的间质中的成纤维细胞生长因子FGF可能是鸡胚中维持间质细胞增殖的分子。 AER和附肢芽中胚层的相互作用 外胚层嵴顶端对于肢芽近远轴图式的发育是必须的。 从正在发育的肢芽中去除AER，将导致肢芽生长的停止；在发育后期将AER去除，可得到较为完整的肢。 生长因子可以替代顶外胚层嵴。 将AER切除后，移植能释放生长因子FGF-8的玻璃珠， 可使肢几乎正常发育。 2. 背腹轴的分化 在鸡翅中，沿背腹轴有一很清晰的图式。背腹轴的组成部分是由早期鸡胚胎预定肢芽区域的外胚层决定，并在背腹轴之间发育形成顶外胚层嵴。 在突变小鼠中控制着脊椎动物肢的背腹轴的基因已经被确定。 Wnt-7a基因在肢背部中胚层图示形成中起到关键作用。 从体节发出的信号参与背部外胚层的确定。在鸡翅芽中，背腹外胚层界线的建立明显有Notch受体信号的参与。 基因Engrailed-1在AER形成之前就已经在附肢腹部的外胚层特异地表达，有可能特化为将来的腹部区域。 外胚层控制发育中肢的背腹轴图式的形成。 Wnt-7a在背部外胚层中表达，而Engrailed基因在腹部外胚层中表达。lmx-1基因在背中胚层中被Wnt-7a诱导表达，并且参与背部结构的确定。 3. 前后轴的特化 附肢芽前后轴的极性是在肢芽能识别之前就已特化。 有两种主要模型用来解释前后轴的特化。一种是极化活动区（zone of polarizing activity，ZPA）可扩散形态发生子模型（ZPA diffusible morphogen model）。另一种是极性坐标模型（the polar coordinate model）。 六. 同源基因在附肢发育中的作用 现代研究认为附肢是通过特异基因在特定细胞中的表达决定的，同源基因可用于解释附肢发育中的所有主要现象。 同源基因决定附肢场 附肢场的边界与诱导能力有关，而此边界是由同源基因的表达模式决定的。 渐进带的相互作用是由msx-1和msx-2基因调节的 AER和位于其下的间质的相互作用是由msx-1和msx-2基因产物调节的。 msx-1基因起初在整个早期的附肢芽中表达，但此后变得局限于直接位于AER下方的渐进带间质中表达。msx-2基因起初是在AER和前部的间质中的表达。 由同源基因决定前后轴和指的特性 HoxD基因家族（Hoxd-9到Hoxd13）的表达模式在小鼠附肢芽的后部边缘是重叠的。这意味着在后部边缘产生小指的细胞表达所有这些基因，而在前部边缘形成拇指的细胞只表达Hoxd-9。显然，在不同Hox-D基因的表达中存在一个编码特化前后指的模式。 Hox基因在决定肢体P－D轴线中的作用 桡骨 尺骨 肱骨 掌骨 和 指骨 Hox基因缺陷导致肢体相应部位的缺失 人的多指症也可能与Hox基因的异位表达有关 七. 细胞死亡与指和关节的形成 脊椎动物附肢中特定细胞的死亡是可遗传的程序性细胞死亡，是进化过程中经自然选择形成的。 细胞死亡在指/趾的成形过程中，特别是关节形成和手指的分离中起着重要的作用。 鸭胚和鸡胚后肢原基中细胞死亡模式的比较。 鸡胚趾间细胞的程序性死亡信号可能由BMP发出， 封阻BMP的受体将会阻止这些细胞的程序性死亡。 noggin expression dominant negative BMP receptor 在早期肢芽中，BMP2、BMP4、BMP7在趾间组织中表达，促进趾间组织的凋亡，趾区表达的noggin可拮抗BMP。 但在较后期的肢体中，BMP促进间质细胞分化为软骨。 在附肢的正常发育过程中，BMP既可以诱导间质细胞发生凋亡，也可以刺激它们分化为软骨形成细胞，这要取决于它们所处的发育阶段。 在关节形成过程中，BMP7可以促进软骨的形成，而BMP2和GDF5在骨之间的位置表达，促进关节的形成。 BMP蛋白可能参与了软骨的稳定和关节的形成过程。鸡肢形成晚期，BMP7（A）和BMP2（B）的表达。 BMP7 BMP2 Noggin蛋白的作用。C，16.5天正常小鼠前肢中GDF5在关节形成处表达； D，Noggin缺陷型突变体小鼠中不表达GDF5，也不形成关节