高中生物多课题串讲 激发思维,享受研究乐趣.ppt

3.刚果红染色筛选 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 采集土样 选择培养（液体选择培养基） 鉴定培养（刚果红鉴别培养基） 纯化培养（固体培养基） 二.实验设计 可以通过颜色反应直接筛选。 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落纯化培养 操作过程： 1.土壤取样： 采集土样时，应选择富含纤维素的环境。若找不到合适环境，可将滤纸埋在于深约10cm的腐殖土壤中一个月左右，也会有能分解纤维素的微生物生长。 2.选择培养 ⑴.选择培养的目的： 增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 2.制备选择培养基 纤维素粉???????????? 5g NaNO3?????????????? 1g Na2HPO4?7H2O?????? 0.5g KH2PO4??????????? 0.9g MgSO4?7H2O????????? 0.5g KCl????????????????? 0.5g 酵母膏?????????????? 0.5g 水解酪素????????????0.5g 定容 1000 mL 可以用滤纸代替纤维素粉 3.选择培养 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。 可重复选择培养。 4.梯度稀释 将选择培养后的培养基进行等比稀释101～106倍。 5.配制鉴别纤维素分解菌的培养基 CMC-Na???????????? 5-10g 酵母膏?????????????? 1g KH2PO4????????????? 0.25g 琼脂???????????????? 15g 土豆汁???????????????100ml 蒸馏水定容到1000ml 按以上比例配制200ml鉴别培养基和10mg/mL的刚果红溶液，灭菌后，按照每200ml培养基加入1ml的比例往培养基中加入刚果红溶液，混匀后倒平板，凝固后待用。 6.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布到平板培养基上，30℃倒置培养，菌落周围会出现明显的透明圈。 7.纯化培养 挑选产生透明圈的菌落纯化培养。 染色法 优点 缺点 方法一 方法二 培养微生物 附.刚果红染色法 方法一：先 ，再加入刚果红进行颜色反应。 方法二：在 时就加入刚果红。 倒平板 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐 刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈， 有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。 微生物实验中需要注意的安全操作 操作安全： 接种时要注意避免手被酒精灯火焰灼伤，接种后要及时提醒学生洗手，以防止被微生物感染； 环境安全： 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 * * * 请认真观察，思考发生了什么？ 发生了群落的演替。 为什么水生群落演替为陆生群落？ 因为环境 的改变。 演替现象说明什么？环境和群落是独立的吗？ 环境与群落是相互影响的。 * 根据生物的营养方式和在生态系统中的作用，将生物分类 板书： 2生态系统组成成分 非生物物质和能量 生产者 消费者 分解者 固体培养基、液体培养基 课题1-1：微生物实验室培养 半固体培养基：观察运动 无动力 有动力(弥散) 课题1-1：微生物实验室培养 微生物在固体培养基表面生长,可以形成 肉眼可见的菌落 用途：纯化、计数、鉴定 重点观察培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小是否基本一致，以判断接种操作和划线纯化是否成功。 合成培养基、天然培养基 马铃薯 20g 蔗糖 2g 水 100mL 琼脂 2g pH （约6.0） 课题1-1：微生物实验室培养 培养基种类 合成培养基、天然培养基 液体培养基、半固体培养基、固体培养基 选择培养基、鉴别培养基、加富培养基 课题1-1：微生物实验室培养 仅适合一种或一类微生物 抑制不需要的微生物生长 知识运用: 培养基种类 培养基成分 根据配方推测培养微生物营养类型 根据培养基pH推测培养微生物类型 课题1-1：微生物实验室培养 实验课学习基本操作技能 ①“培养基配制”学习如何配制培养基、高压灭菌、培养基分装、倒平板等技能 ②“接种与培养大肠杆菌”学习各种接种技术如斜面接种