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苯丙氨酸生物成的5个关键酶基因的串联表达
复旦大学
硕士学位论文
苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达
姓名:吴永庆
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:范长胜
2002.5.12
苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达 第1页共27页
摘要
、 /
、f在大肠杆菌中,ppsA和pckA基因分别编码糖代谢中心途径的磷酸烯醇丙酮
因分别编码苯丙氨酸生物合成途径中的关键酶彩
本研究工作从大肠杆菌K12诱变菌株基因组中用PCR方法扩增得到了ppsA
和pckA基因,并人工合成了黄色短杆菌PBF启动子。在已经构建的含有aroG、
然后用电转化方法导入黄色短杆菌中进行酶活性检测和产酸发酵研究。结果表
明,ppsA和pckA基因的串联表达有利于苯丙氨酸生物合成途径下游产物的生成。
转化了pJN5质粒的菌株,其苯丙氨酸产量提高到了出发菌株的3.4倍,比携带
pJN3质粒的菌株提高了13%。
~一
关键词 苯丙氨酸 矿 一 大肠杆菌
黄色短杆菌 一 一
复旦丈学撰写科学报告和学位论文专用纸
苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达 第2页共27页
Abstract
Phosphoenolpyruvatesynthase(PpsA)andphosphoenolpyruvate
carboxykinase
(PckA)are to
keyenzymesproducePhosphoenolpyruvate(PEP),alimitingprecursor
of the ofcarboncentermetabolism.InEscherichiacoli.
L—phenylalanine.onpathway
ale and and
encoded 3
they by pckAgenesrespectively.Thegenes,aroG,pheA
ppsA
the
on biosynthesis.
tyrB,encodekeyenzymespathwayofphenylalanine
Inthis and were from ofEscherichia
work,ppsApckAgenes amplifiedgenome
K12mutantstrain chain the of
coli reaction,while PBF
bypolymerase promoter
Brevibacteriumwas ontheshuttlevector
flavumartificiallysynt
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