四川省岳池县第一中学2014-2015学年高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案.docVIP

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 学习目标 研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定 学习重点 对土样的选取和选择培养基的配制。对分解尿素的细菌的计数。 学习难点 对土样的选取和选择培养基的配制。对分解尿素的细菌的计数。 课前预习 使用说明与学法指导 生物选修一专题二课题二 知识准备 1．筛选菌株 (1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 或 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 （3）配制选择培养基的依据 根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养 微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养 的微生物，加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。 2．统计菌落数目 （1）测定微生物数量的常用方法有 和 。 （2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 3．设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。例如：为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养 的培养基作为空白对照。 4、实验设计 关于土壤中某细菌的分离与计数实验操作步骤如下： ⑴． 取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的 中。 ⑵．制备 ：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基 将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为 ，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 ⑶．样品的 和微生物的 与观察 将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液 ml，转移至盛有 ml的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、101、102…… 依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取 ml进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。 将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含 培养基的斜面中，观察能否产生如教材中图2-lO的颜色反应。⑴．细菌的计数 ⑷当菌落数目稳定时，选取菌落数在 的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 预习自测题 1．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水 D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 2.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因 ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 课内探究 质疑探究 探究一 探究二 归纳总结 尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶。 知识网络图 当堂检测 1、分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 和