血清转氨酶检测标准化实验.docVIP

血清转氨酶检测标准化实验【关键词】血清转氨酶； 检测；标准化 【中图分类号】R446.1【文献标识码】A文章编号：1004-7484（2012）-05-0814-01血清中约有20多种转氨酶，临床常用来测定肝功能的转氨酶有血清谷一丙转氨酶(GPT又称丙氨酸氨基转移酶ALT)和谷一草转氨酶(GOT，又称天门冬氨酸氨基转移酶AST)。测定此两种酶在血中的活性增高值，常能反映肝细胞的受损与坏死程度，这是病毒性肝炎最敏感的肝功试验指标。1.生化特性及病理生理 转氨酶在心肌、肝、脑中含量最高，其次是骨骼肌、肾脏。肝内的AST绝对值超过ALT，ALT在肝内含量最多，总量亦只有AST的1/3。AST80%存在于肝细胞的线粒体内，细胞浆中仅占20%，而ALT只分布在肝细胞浆中。ALT和AST其半衰期极短，一般为2-6d。在肝细胞破坏或严重损害时，ALT和AST即从细胞内逸出而进入血液，使血清ALT和AST增高。l500个肝细胞中只要有2个遭到破坏，血清ALT就能反映出来，故它是肝细胞膜通透性增强的极敏感的指标。AST除在肝细胞破坏损害中增高以外，在心肌病变如急性心肌梗死、骨骼肌严重损害时也可升高。2.血清转氨酶的检测 2.1测定方法：关于ALT和AST活性的测定：目前国内主要采用IFCC，欧洲常用DGKC法和ECCLSI法。三种酶反应均是加入底物到反应混合物中启动反应，最适温度37℃。ALT活性：室温下(20°C)和4-8°C血清可稳定7d。 AST活性：室温下(20°C)持续轻度降低，4-8°C血清可稳定7d。 2.2参考范围：ALT正常值：比色法(赖氏法)：5-25Karmen。 速率法：0-40U/L(37°C)。 AST正常值：比色法(赖氏法)：8-28Karmen。 速率法0-40U/L(37℃)。3.临床思路 3.1除外非疾病因素： 3.1.1体育活动。剧烈锻炼时，引起细胞膜通透性改变，肌肉系统释放转氨酶增多。 3.1.2溶血。由于红细胞内AST含量较血浆中高40倍，故溶血血清AST可呈高值，采血后，应尽早分离血清，避免溶血。 3.1.3巨AST酶。AST和免疫球蛋白之间形成的复合物，尤其是胞质性AST和IgG的共同影响，可导致AST活性达到参考上限的30倍。巨AST能用电泳的方法检测。 3.1.4检测方法操作不当。血清标本在室温下保持数小时即活性降低，使结果不准，故应低温下保存，尽早测完。 3.2血清ALT病理性升高。除外肝外脏器病变的情况外(如急性心肌梗死、心肌炎等疾病和药物因素)，血清转氨酶升高在一定程度上反映了肝细胞的损害和坏死程度，又由于肝内ALT活性超过体内其他任何脏器该酶的活性，故测定ALT比AST对反映肝损害更具有特异性。 3.2.1ALT为非特异性肝损害指标。单项ALT升高，考虑无黄疸型肝炎、脂肪肝、药物性引起的肝损害等因素。 3.2.2肝炎(无黄疸型)。当考虑无黄疸型肝炎，要询问有无肝炎病史和消化系统症状，如有肝炎史，原来肝功能已正常，这次ALT升高，可能为肝炎在活动；原来ALT高现在虽然也高但较原来降低，说明仍然是肝炎在活动。 3.2.3多个或成批患者集体出现ALT升高，要想到集体感染肝炎。 3.2.4ALT升高伴甲状腺功能亢进。患者出现肝脏受累、肝脏免疫损坏、甲状腺激素直接作用以及营养不良或缺氧可使转氨酶升高，或胆汁淤积性黄疸。 3.2.5AST/ALT改变。AST80%存在于肝细胞的线粒体内，20%存在于肝细胞细胞浆中，而ALT只存在于肝细胞细胞浆中，故正常肝细胞细胞浆中的AST/ALT比值为0.6左右。急性肝炎患者AST低于ALT，比值1。重型肝炎时，线粒体同时遭受严重破坏，AST从线粒体和胞浆释出，其值明显增高，因而改变了AST/ALT的比值，两者的比值可反映肝细胞损伤的严重程度，并可估计患者的预后。AST/ALT比值在0.31-0.63之间，预后良好，0.64-1.19之间与预后无明显关系，1.20-2.26之间提示有肝坏死，患者可能死亡。 3.3结合胆红素检查结果进行诊断。ALT升高伴胆红素升高首先考虑急性黄疸型肝炎。急性肝炎起病后有畏寒、发热、厌食、恶心、呕吐等黄疸前期症状，血清ALT明显升高。各型急性肝炎在黄疸出现前3周，ALT即开始升高，直至黄疸消退后2-4周才恢复正常。过去无肝炎病史而有以上表现者，先考虑甲型或戊型肝炎。 无黄疸者可临床拟诊为急性无黄疸型甲型肝炎。起病较慢有乏力、厌食、恶心、肝区痛、肝大、压痛等症状及体征，血清ALT升高。而又排除其他原因引起的肝损害，病程在6个月以内者，可临床拟诊为急性无黄疸型乙型或丙型肝炎。 乙型或丙型肝炎病程超过半年，病情较轻，有肝区痛和乏力，带有轻度肝功能损害或A