结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相.ppt

各位老师好！; ;引言;? 肿瘤的复发和转移是当今肿瘤治疗最棘手的问题之一。据统计，有90%以上的癌症病人死于肿瘤的复发或转移。研究肿瘤细胞转移的分子基础及其与癌基因及抑癌基因的关系，已成为目前肿瘤防治研究的热点问题。真核细胞增殖调控是一个多因素、多环节、涉及到细胞内众多分子事件的复杂过程。在细胞增殖调控中，大多数癌基因是促进与发挥正调作用，而抑癌基因则是抑制与负调作用。它们在正常细胞中可能有调节细胞正常生长、抑制肿瘤形成的作用，它们的失活或缺失会导致细胞增殖失控或癌变。;; 粘附分子CD44是淋巴细胞的一种归巢受体，为高度异质性的单链跨膜糖蛋白，参与细胞与细胞间、细胞与基质间的粘连，有标准型（CD44s）和变异型（CD44V）两型。据报道，其变异体CD44v6 过表达与结直肠癌的侵袭能力有关｛3，4｝。 ;核苷二磷酸激酶（NDPK/ nm23）属NME基因家族，被认为参与了同恶性肿瘤转移相关的多种调节活动。nm23异常改变一方面可引起微管聚合而成的纺锤体异常，导致非整倍体形成；另一方面可通过细胞骨架及细胞素等信号反应性的改变引起细胞运动，从而参与侵袭和转移过程。研究发现啮齿动物实验性肿瘤的转移能力与nm23基因的表达呈密切负相关｛5｝，Bertheau 等｛6｝在甲状腺恶性肿瘤中研究证实nm23及基因产物的表达与肿瘤的转移和预后相关密集，nm23的mRNA 下调与肿瘤的淋巴结转移和低生存率有关。 ? ;结直肠癌（colorectal carcinoma）是人类常见恶性肿瘤之一，对人类的健康构成了极大威胁。近年来对结直肠癌相关基因产物的检测已逐步和早期诊断、发病机制、病理特征、估计预后等密切联系起来，但研究结果不尽一致[7-10]。目前分子病理学研究认为，结直肠癌的发生是个多阶段、多因素作用的过程，主要是由于癌基因激活、抑癌基因及DNA修复基因突变或功能缺失所致。我们应用免疫组织化学方法同时检测结直肠癌中癌基因蛋白c-erbB-2、CD44v6及nm23的表达，并探讨其与病理特征和临床预后的相关性。 ? ? ? ? ? ? ;材料和方法;1.1材料 1.1.1临床资料： 92例结直肠癌： 28例：有十年以上随访结果 64例：无随访结果 以上病例均为结直肠原发性腺癌，不含腺瘤癌变的病例，都只作了结直肠癌根治手术，未作化疗、放疗等辅助治疗。男性49例，女性43例，年龄24～75岁（中位55岁）。结肠癌27例，直肠癌65例。根据国际抗癌联盟（UICC）的TNM分期标准[11]（见表1）作临床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期28例，Ⅲ期37例，Ⅳ期8例。 ;表1 UICC结直肠癌TNM分期标准;表1 UICC结直肠癌分期;表1 UICC结直肠癌分期;表1 UICC结直肠癌分期;1.1.2病理资料： 92例结直肠癌中，高分化腺癌16例，中分化腺癌45例，低分化腺癌21例，粘液腺癌10例。对全部病例观察了镜下肿瘤生长方式（推进式为主34例，图1；浸润性为主58例，图2）以及瘤周淋巴样细胞聚集情况（21例见有大量淋巴样细胞浸润，图3；71例无大量淋巴样细胞浸润，图2）。 ;呈缉镭记汛窜痞彝恤炎俱耽卷舔癸芽言葡抢钢品涩撒她鹃攻刚滥冀藤邮贰结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相;娟稀寐油使碍场捞村奶顷椿床芳融爽曹晚瘁谩予岿偶冀痈茂珍镭恃咏敦姚结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相;启菜嘿绞瓜骑啦皖郁烂涤妨腐地喜呀钥据格被预允抵肺夕阑废预体公妈丧结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相结直肠癌c-erbB-2、CD44v6 和nm23表达 和临床病理特征和预后相;1.1.3主要试剂及实验材料： c-erbB-2 单克隆抗体（克隆系TAB250），工作浓度1：100；CD44v6单克隆抗体（克隆系2F10）, 工作浓度1：100；nm23单克隆抗体（克隆系M-0421），工作浓度1：80。抗原修复液为0.01M、PH6.0 枸橼酸盐缓冲液，DAB显色。以上试剂、二抗及SP试剂盒均为DAKO公司产品。免疫标记阳性对照组织来自乳腺癌、胃癌。 ; 1.2 方法 1. 2.1 标本及玻片的处理： 所有标本经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，3～4μm连续切片。每例选取四张切片贴于经多聚赖氨酸处理的玻片上，70 oC烘烤2小时，1张进行HE染色，其余3张进行免疫组织化学染色。 ;1.2.2 HE染色：;1.2.3 c-e