上海交通大学致远学院2015年春季学期及途径探究.docVIP

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上海交通大学 致远学院 201年季学期 课程教学说明 课程基本信息 开课学院(系):致远学院 课程名称:学时/学分:学时/ 学分 上课时间: 上课地点: 任课教师: 办公室及电话: 助教:××××××Office hour: 课程主要内容() 实验二 大肠杆菌培养和构建4学时 【目的与要求】 学会挑单克隆,接种培养细菌 构建质粒,基因克隆技术 实验三 原位PCR扩增目的DNA片段及琼脂糖凝胶电泳鉴定6学时 【目的与要求】 1.了解PCR的原理,掌握PCR操作方法 1.掌握基因克隆技术 2.掌握质粒载体体外连接转化操作 实验五 阳性重组子的鉴定——质粒抽提和酶切电泳鉴定5学时 【目的与要求】 1.掌握碱裂解法分离纯化质粒DNA。 实验六 蛋白实验接种活化、诱导表达浓度4学时 【目的与要求】 1. 蛋白实验全局设计安排实验工作。 2.了解重组蛋白表达的方法和意义 3.掌握活化甘油菌、液体接种。 实验七 重组蛋白的诱导表达,收集裂解菌体6学时 【目的与要求】 1.了解 【目的与要求】 1.掌握Ni-NTA 树脂变性亲和纯化蛋白方法 2.学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。 3. 掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术。 课程教学进度安排 教学内容 教学形式 第2周 实验认知准备及接种实验 实验教学 第3周 大肠杆菌培养和构建 实验教学 第4周 原位PCR扩增目的DNA片段及琼脂糖凝胶电泳鉴定 实验教学 第5周 目的基因与质粒载体连接转化 实验教学 第6周 阳性重组子的鉴定——质粒抽提和酶切电泳鉴定 实验教学 第7周 蛋白实验接种活化、诱导表达浓度 实验教学 第8周 重组蛋白的诱导表达,收集裂解菌体 实验教学 第10周 重组蛋白的分离、纯化、SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 实验教学 课程考核方式及说明 教材与参考书 3

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