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羊表皮生长因子(EGF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用
(EGF) ELISA
羊表皮生长因子 酶联免疫分析 ( )
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定羊血清,血浆及相关
液体样本中表皮生长因子(EGF)活性。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中羊表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的羊表皮生
长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子
(EGF),再与HRP 标记的表皮生长因子(EGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中羊表皮生长因子(EGF)活性浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:90IU/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂 液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B 液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20 倍)×1瓶 (20ml×30 倍)×1瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固 10-20分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDT 、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,
离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再
次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中
如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓
度达到 100万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟
左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定
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