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实验二、转座子随机突变和目标表型筛选
马玉超
北京林业大学生物科学与技术学院
办公地点：生物楼117；电话
Email:myc0307@;实 验 内 容;转座子随机突变及目的表型的筛选
李丽萍
;实验目的;实验原理;实验原理;实验原理;Tn5的转座机理;小奔珍掖衔兑遍伯抨流苏讥钻令谗侄慎坊蚤拨梆默与喀攫叫小汗塔极互凋实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选;霹蝇顷硅膛责辈冻聊碌撬累树区满吸梯区庸伦茸先辞感蝎述器户呕逻方奸实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选;实验原理;实验原理;实验原理;实验原理;屑迹摆尿脂制梳斜鼻棕春惧锭篡闻酱骄勤翔近凄曝晦踩焊剃跪言肇寅孽持实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选实验二、转座子随机突变及目标表型的筛选;实验材料;(2).用于IAA摇瓶培养的培养基(MAZ培养基);(3).抗生素;实验步骤;第三天：
用液体LD培养基洗下菌泥，铺于同时含有Km、Ap、Nx的LD平板上，30℃培养，筛选接合子。
第四天：
挑取接合子在含有上述三种抗生素的LD培养基平板上划线分离，保证得到的为单菌落。
第五天：
挑单菌落分别接种于5ml MAZ培养基中30℃摇瓶培养（野生菌对照）.;第六天：
用比色法测定菌液中的IAA含量。
比色试剂：含12g/L FeCl3 的H2SO4 注意安全
取1ml 测量OD600；
取1ml 菌液12000rpm 离心 5min后取上清与比色试剂等量混合，摇匀后在暗处放置30 min，然后测OD540nm
注：空白对照，未接菌的培养基与比色用试剂的混合液。
;标准曲线;实验结果;●下次实验
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