双波长吸光度比值法检测碳氧血红蛋白.pdfVIP

临床检验杂志2008年第26卷第1期 Chinese Journal of Clinical Laboratory Science，2008，Vo1．26，No．1 61 文章编号：1001-764X(2008)01-0061-02 中图分类号：R446．1 文献标识码：A · 实验技术 · 双波长吸光度比值法检测碳氧血红蛋白 张菁菁，王东霞，王伟，秦静(新乡医学院第三附属医院检验科，河南新乡453003) 摘要：目的 建立测定血液中碳氧血红蛋白(HbCO)含量的方法。方法 采用双波长吸光度比值法测定血液中HbCO含量， 以HbCO饱和度10％为CO中毒诊断标准。结果 还原血红蛋白(Hb)的最大吸收峰波长在431．5 nm处，HbCO的最大吸 收峰波长在421．5 nm处，健康人血液中HbCO饱和度平均1．65％。结论 采用双波长吸光度比值法检测血液中HbCO含量， 简便易行，适用于急性CO中毒的快速诊断。 关键词：碳氧血红蛋白；一氧化碳；双波长吸光度比值法；中毒 CO中毒的临床诊断主要依靠病史、临床症状和 1．4 待测样品的处理和检测 取静脉血1．0 ml，注 实验室检查，而快速、准确检测血液中HbCO含量是 入EDTA—K 真空抗凝管中，立即送检。取抗凝血10 CO中毒诊断的重要依据。我们对血液中HbCO的 l，加入内盛15 ml 0．02 mol／L Tris稀释液的具塞试 分光光度定量分析法…进行了改进，建立了双波长 管中混合，加入60 mg Na S O ，混匀，室温放置10 吸光度比值法以快速检测血中HbCO，以碳氧血红 min，用CL 770分光光度计光谱扫描，波长范围400 蛋白饱和度表示血液中HbCO含量，并应用于CO ～ 500 nm，观察吸收光谱形状及吸收峰位置，并记录 中毒的临床诊断，取得了满意的效果。 420 nm和430 nm处的吸光度值。 1 材料和方法 1．5 计算 在相同检测条件下，分别得到0％Hb— 1．1 试剂与仪器 0．02 mol／L Tris稀释液、连二亚 CO、100％HbCO、待测样品在420 nm与430 nm波 硫酸钠(Na S O )、EDTA—K 真空抗凝试管、浓硫酸 长处的吸光度值，并计算出两波长的吸光度比值，然 (P=1．84 g／m1)、85％甲酸，岛津CL-770分光光度 后代人下式计算待测样品中HbCO饱和度。公 计，光谱扫描范围325～800 nm。 式[21： 1．2 纯CO气体的制备 在安装有滴液漏斗和气 体导出管的烧瓶中加入50 ml甲酸，将50 ml浓硫酸 Hbc。％ = 三 三二__ × 。。％ 装入滴液漏斗并缓慢滴加到甲酸中，产生的CO气 式中：(A 加／A 3。)。为HbCO饱和度为0％样品在波 体通过导管通人样品液中。操作要在良好的通风橱 长420nm与430nm处的吸光度比值。(A 。／A 3。) o0 中进行。 为HbCO饱和度为 100％样品在波长420nm与 1．3 HbCO饱和度分别为0％和100％样品稀释液 430nm处的吸光度比值。(A 。／A ，。) 为待测样品 的制备与检测 取不吸烟健康人静脉血3．0 ml，注 在波长420nm与430nm处的吸光度比值。 入EDTA—K 抗凝管中混合，通人空气10min，使Hb— 将HbCO饱和度为0％、100％的样品分别测定 CO充分转化为氧合血红蛋白，得到HbCO饱和