医学免疫学试验课教学大纲.docVIP

《临床免疫学与检验》实验教学大纲 课程名称：临床免疫学与检验 英文名称：Clinical Immunology and Laboratory Immunology 课程性质：专业课程(独立开课) 本课程是在学生已学习基础免疫学及临床医学课程的基础上进行，实验教学以免疫学技术和免疫性检验为重点，通过实验，加深对免疫学技术基本理论的了解和应用；培养学生正确地熟练地掌握有关免疫学技术基本操作技能和有关的基本知识；学会正确记录和处理实验数据及正确表达分析结果的方法；培养学生实事求是、严谨的科学作风和认真细致整洁的实验习惯；并培养学生具有一定的从事科学实验的能力；为今后从事医学检验工作和科学研究打下良好的基础。通过实验，要求学生掌握常用免疫学技术和免疫性检验方法的原理、操作、结果判定、质量控制及方法学评价 及临床意义。 适用专业：医学检验专业本科 考核方式： 根据上实验课和实验报告的评定实验成绩，实验成绩占免疫学总成绩10%。 课程简介：该课程是医学检验专业本科生教学的必修课程，基本原理和内容概要，教学大纲要求总学时90，其中理论教学45学时、实验45学时。实验教材及参考书： 教 材：刘辉 主编，《临床免疫学与检验实验指导》人民卫生出版社，第3版，2008。 参考书：金伯泉 主编，《医学免疫学》人民卫生出版社，第五版， 2008年。 吴敏毓 刘恭植主编，《医学免疫学》中国科技大学出版，第四版， 2002年。 陈慰峰 主编，《医学免疫学》人民卫生出版社，第三版， 2001年。 实验一 免疫原和抗血清的制备 类别：综合性实验 实验目的和要求： 1.掌握免疫原制备方法;2.掌握免疫血清制备的原理和方法。 实验内容： 1. 人全血清抗原的制备；2.制备弗氏完全佐剂；3.制备佐剂-人全血清抗原乳化剂；4. 免疫动物。 四、学时：5 五、主要仪器设备： 显微镜、水浴箱、玻片、推片 六、实验中注意事项： 实验二 溶菌酶实验及吞噬细胞的吞噬试验 类别：验证性实验 二 实验目的和要求： 掌握小吞噬与大吞噬试验的原理、操作过程、结果判定及临床意义。掌握溶菌酶溶菌的原理、溶菌酶试验的操作方法及临床意义。 三、实验内容： 1、收集唾液标本，加入制备好含溶壁微球菌的琼脂平板的孔中，37度18-24小时后观察 结果。 2、外周血中性粒细胞小吞噬实验（每人操作）：取外周血加入抗凝试管，加入葡萄球菌 悬液，37度温育10到15分钟，取出作血涂片，瑞氏染色，显微镜油镜观察。 3、腹腔巨噬细胞大吞噬实验（示教）：观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的示教片。 四、学时：5 五、主要仪器设备： 显微镜、水浴箱、空平皿、已经制备好的含有溶壁微球菌的琼脂平板玻片、推片、注射器 六、实验中注意事项： 1、血涂片不宜太薄或太厚。2、温育时间控制在15分钟以内。溶菌酶实验结果24小时后（第二天）观察，观察时应该携带带有刻度的直尺。 实验三 淋巴细胞培养技术及T淋巴细胞转化试验 一、类别：示教性实验及验证性实验。 二、实验目的和要求： 掌握T淋巴细胞转化试验的原理、操作方法、结果判定及临床意义。熟悉淋巴细胞培养技术操作要点。 三、实验内容： 取健康人外周血0.2ml 加入3.8ml含有PHA的培养液的培养瓶中，37度培养3天~5天，取出细胞部分涂片，瑞氏染色，显微镜油镜观察。 四、学时：5 五、主要仪器设备： 培养瓶、移液器、刻试移液管、CO2孵育箱、倒置显微镜 六、实验中注意事项： 1、严格无菌操作。2、血液要新鲜。 实验四 小鼠免疫器官的解剖及脾脏单个核细胞分离 一、类别：综合性实验。 二、实验目的和要求： 熟悉小鼠主要免疫器官的解剖部位，熟悉获取小鼠脾脏细胞操作过程。掌握单个核细胞分离技术。 三、实验内容： 收集实验一免疫动物非抗凝血及抗凝血后处死。 抗凝血取血清冷冻保存备用。取外周肝素抗凝血，流式检测抗体染色、固定后待检。 解剖并获取已处死实验小鼠脾脏，玻片研磨获取脾脏细胞，Hanks液洗涤混悬，加在已放入淋巴细胞分离液的试管中，2000转/分，离心20分钟，取出分层液上面的细胞，导致显微镜下观察、计数。 四、学时：5 五、主要仪器设备： 解剖剪、镊子、磨砂玻片、试管、刻度吸管、毛细吸管、离心机、倒置显微镜、移液器、血细胞计数板、水平离心机、显微镜、水浴箱 六、实验中注意事项： 1、严格无菌操作。2、先加淋巴细胞分离液后慢慢加入血液。3、尽量洗净红细胞。4、Hanks液脾细胞悬液：淋巴细胞分离液为1：1。5、控制好离心速度和时间、温度。5、总实验温 度一般保持在15-23度为最宜。6、淋巴细胞离体后不能超过6小时。 实验五 流式细胞仪技术及淋巴细胞亚群分析实验 类别：综合性实验。 实验目的和要求： 掌握细胞表面染色方法以及流式细胞仪的操