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高中生物2017年第1部分专题5课题1DNA的粗提取与鉴定(选修一)课件
第一次加氯化钠后,必须充分晃动烧杯,使二者混合均匀,加速染色质中DNA与蛋白质分离,使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。第二次加氯化钠溶液也是为了DNA的再溶解,这时溶液中的蛋白质含量已很少。第三次加氯化钠溶液还是为溶解DNA。 点击进入 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 返回 第 1 部分 专 题 5 课题 1 理解教材新知 把握热点考向 应用创新演练 知识点一 知识点二 考向一 考向二 1.DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。 2.DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些蛋 白质溶于酒精,可利用酒精将DNA和蛋 白质分开。 3.DNA对蛋白酶、高温和洗涤剂有耐受性。 4.在加热条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 5.哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核,不能作为提取DNA的实 验材料。若选取肝脏细胞或植物细胞,则必须充分研磨。 6.实验中加入柠檬酸钠的作用:作为抗凝剂,防止血液凝固。 [自读教材·夯基础] 1.原理 (1)DNA和蛋白质等其他成分在 溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的 就能使DNA充分溶解,而使 沉淀,或者相反,以达到分离目的。 (2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精,这样可将DNA和蛋白质进一步分离。 不同浓度的NaCl 盐浓度 杂质 (3)DNA的鉴定:DNA+ 。 二苯胺 蓝色 2.DNA的耐受性 (1)蛋白酶不能水解 ,能水解 。 (2)DNA在 变性,大多数蛋白质在 就可以变性。 (3)洗涤剂不能分解 ,但可以瓦解 。 DNA 蛋白质 80 ℃以上 60 ℃~ 80 ℃ DNA 细胞膜 如何将DNA进一步提纯?提纯后是否能得到纯净的DNA? 提示:利用DNA不溶于冷酒精,而蛋白质溶于冷酒精的原理进一步提纯DNA。提纯后的DNA中仍含有一定量杂质。 [跟随名师·解疑难] 溶解规律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 DNA 溶解 析出 蛋白质 NaCl溶液浓度从2 mol/L降低的过程中,蛋白质溶解度逐渐增大 部分发生盐 析沉淀 溶解 DNA的溶解度 溶解规律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 总结 ①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14 mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大 ②选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的 [自读教材·夯基础] DNA含量相对较高 蒸馏水 洗涤剂 NaCl溶液 嫩肉粉 60 ℃~75 ℃ 木瓜蛋白 1.可否选用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,为什么? 提示:不可以,因为哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 2.提纯时,为什么要选用体积分数为95%的冷酒精? 提示:冷酒精提纯效果更好。 [跟随名师·解疑难] 1.实验材料的选取 (1)鸡血适宜作为实验材料的两个原因:一是因为鸡血细胞核中的DNA含量丰富,材料易得;二是因为鸡血细胞易吸水涨破。 (2)材料的处理(以鸡血为例): 2.实验过程中的几点注意事项 (1)两次使用蒸馏水的作用:第一次用蒸馏水是使鸡血细胞吸水涨破,提取核DNA;第二次用蒸馏水稀释NaCl溶液,使DNA析出。 (2)实验中三次过滤操作的比较: 过滤次数 过滤目的 第一次 过滤核外物质,除去不溶的杂质 第二次 过滤除DNA
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