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维生素A对SD大鼠食欲及下丘脑神经肽Y基因表达影响【摘要】 目的 探讨维生素A对SD大鼠食欲和下丘脑神经肽Y基因表达的影响，初步探讨维生素A影响大鼠食欲的机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为2组：A组（维生素A缺乏组）和B组（对照组）。喂养74 d，A组随机取出16只，分为2组:A?1组(维生素A缺乏组)和A?2组（维生素A皮下补充组）；B组随机取出8只，为B?1组（对照组）。实验79 d，将这3组大鼠全部处死，取血和组织进行相关指标测定。A组剩余的动物按体重随机分为2组：A?3组（维生素A缺乏组）和A?4组（维生素A食物补充组）。B组剩余的8只动物为B?2组（对照组）。30 d后将其全部处死，取血和组织进行相关指标测定。结果 维生素A缺乏组进食量显著低于正常对照组，给予缺乏组大鼠维生素A皮下和食物补充后，大鼠进食量显著增多。维生素A缺乏组下丘脑神经肽Y mRNA表现为低表达，皮下补充维生素A后大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的表达水平明显升高。结论 维生素A影响大鼠食欲的可能机制是改变了下丘脑有关控制食欲的基因表达。 【关键词】 维生素A；大鼠；食欲；精神肽Y；基因表达 【中图分类号】 Q 562 Q 786 R-332 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000-9817(2008)12-1131-04 维生素A是小儿生长发育的必需营养素，早在20世纪70年代，就有学者指出，维生素A与食欲关系密切。研究人员在对厌食儿童的研究中发现，病例组的维生素A水平明显低于对照组，暗适应时间明显延长，认为维生素A与儿童食欲有相关关系［1］。本实验通过为期103 d的动物实验，探讨维生素A缺乏与补充对大鼠食欲的影响及下丘脑控制食欲有关基因的表达，初步探讨维生素A影响大鼠食欲的机制。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试剂和仪器 维生素A（美国Acros Organics）、全反式视黄酸（美国Sigma）、高效液相色谱仪（美国Waters公司）、紫外可见光分光光度计（DU650, 美国BECKMANDU）、水平电泳槽（美国Bio-Rad）、凝胶成像系统（江苏捷达）、7000荧光定量PCR仪（美国ABI公司） 1.1.2 动物饲料配方及制作 基础配方(表1)原则参照美国营养学会(AIN)-93G纯化饲料［2］要求及文献略加改良。其中所含营养素和能量保证大鼠生长发育的基本要求。在此基础上减去维生素A含量，配置成维生素A缺乏颗粒状饲料。 注：a为维生素A含量低于可检测水平；b为每千克混合无机盐中各成分：碳酸钙357.00 g、磷酸钾196.00 g、氯化钠74.00 g、硫酸钾46.60 g、柠檬酸钾70.78 g、氧化镁24.00 g、柠檬酸铁6.06 g、碳酸锌1.65 g、碳酸锰0.63 g、碳酸铜0.30 g、碘酸钾0.01 g、硒酸钠0.01025 g、钼酸胺0.007 95 g、氧化铬0.275 g、硼酸0.081 5 g、氟化钠0.063 5 g；c为每千克混合维生素中各成分：尼克酸3.000 g、泛酸钙1.600 g、维生素B 60.700 g、维生素B?1 0.600 g、核黄素0.600 g、叶酸0.200 g、生物素0.020 g、维生素B?1 20.002 5 g、维生素E 15 g、维生素D 30.25 g、维生素K 0.075 g。 制作饲料前将结晶状矿物盐磨成粉状，然后与其他无机盐混匀,确保达到最小颗粒用于配置饲料。配饲料时首先将原料称好，将油、混合维生素、混合矿物质分别用少量淀粉充分混匀，然后将3种混合物与小量大宗原料混合，再逐步扩大混合，以达到充分混匀［3］。饲料加工成颗粒状饲料，加工过程中严格控制温度，加工后用辐照灭菌。对加工好的饲料进行维生素A检测［4］，维生素A含量远远低于45 μg/kg，已低于可检测水平，未能检出，近似为零。 1.2 方法 1.2.1 动物分组 健康雄性21～23 d断乳期SD大鼠48只,（上海斯莱克实验动物有限责任公司），清洁级，动物合格证号：SCXK（沪）2003－0003。实验动物随机分为2组：A组，32只，为维生素A缺乏组（VAD组）；B组，16只，为维生素A正常对照组（B组，Control组）。2组大鼠均给予维生素A缺乏饲料，见表1。缺乏组大鼠用菜籽油按1 mL/kg灌胃，正常对照组维生素A的补充剂量为每在18 μg/kg体重［2］，按1 mL/kg灌胃。2组平均体重分别为：A组, (80.38±4.87) g；B组, (81.69±4.05)g, 组间差异无统计学意义。实验第74天，A组动物随机取出16只，分为2组：A?1组，维生素A缺乏组，8只，皮下注射菜籽油，剂量为50 mg/kg；A?2组，维生素A皮下