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脂联素基因多态性及青少年肥胖相关性研究【摘要】 目的 研究脂联素基因第+45位点单核苷酸多态性与青少年肥胖的相关性,为青少年肥胖防治提供依据。方法 选择台州市第二中学初中二年级健康体检时肥胖中学生47名为肥胖组,选择体重正常中学生50名为对照组,检查血压、血糖、血脂、胰岛素、脂联素和体脂含量。采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-RFLP)检测+45位点单核苷酸多态性。结果 肥胖组血压、BMI、HOMA-IR、躯干部体脂百分比均高于对照组,而血清脂联素水平低于对照组。多元逐步回归分析显示,总体脂百分比、躯干部体脂百分比和HOMA-IR是血清脂联素的独立相关因素,为负性相关。2组学生+45位点基因型频率差异无统计学意义,等位基因频率差异也无统计学意义。结论 青少年肥胖存在低脂联素血症,血清脂联素与体脂含量和胰岛素抵抗呈负相关,未发现脂联素基因第+45位点单核苷酸多态性及其与青少年肥胖相关。 【关键词】 学生;脂联素;基因;多态性,单核苷酸;因素分析,统计学 【中图分类号】 Q 75 R 153.2 R 195.1 R 589.2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000-9817(2010)01-0019-02 肥胖已成为我国面临的一个严重的公共卫生问题,成为现代社会的流行病,青少年肥胖或超重现象尤其令人担忧。研究发现,北京市7～15岁青少年肥胖检出率为10.7%,肥胖人群以每年近1%的速度增加[1]。青少年超重或肥胖很容易移行到成年[2],从而导致一系列健康问题。脂肪组织分泌的脂联素(adiponectin)具有抗动脉粥样硬化作用,并与肥胖、血压、糖代谢、胰岛素分泌和脂代谢有关[3-8]。人脂联素基因存在多种单核苷酸多态性,脂联素基因的变异可能会成为肥胖的遗传学基础[9]。本文旨在探讨脂联素基因第+45位点单核苷酸多态性与青少年肥胖的相关性。 1 对象与方法 1.1对象 选择台州市第二中学,对初中二年级13～14岁的全部学生940名(男453名,女487名)进行健康体检。选取BMI在同年龄、同性别第95百分位数或以上者47名为肥胖组[10];对照组为年龄、性别相匹配的同期健康体检学生,BMI在同年龄、同性别第25～75百分位数以内者50名。肥胖组男生24名,女生23名;对照组男生25名,女生25名。以上学生均征得家长同意参加本研究。 检查项目包括(1)一般项目:性别、年龄、身高、体重、血压、心率,计算BMI。(2)生化指标:空腹血糖、血脂、肝功能、肾功能、空腹胰岛素和血清脂联素,计算胰岛素抵抗指数(用HOMA-IR评估)。血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,胰岛素测定采用化学发光法,脂联素测定采用ELISA法(试剂盒为美国RD公司产品)。(3)双能X线吸收法(Hologic QDR 4500W)测定体脂含量及分布,包括总体脂含量(T-Fat)和躯干部体脂含量(Tr-Fat)。(4)DNA 抽提及多聚酶链反应――限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测[11]:采用常规氯仿法提取外周血白细胞DNA。PCR-RFLP检测脂联素基因第二外显子+45位点多态性。上游引物:5’―GCAGCTCCTAGAAGTAGACTCTGCTG―3’;下游引物:5’―GCAGGTCTGTGATGAAAGAGGCC―3’。PCR产物经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳验证后进行酶切反应(限制性内切酶SmaI由上海生物工程服务有限公司提供)。酶切后进行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳。基因型检测采用Bio-Rad凝胶成像分析系统观察电泳条带并记录基因型条带。+45T/G多态性位点经限制性内切酶SmaI酶切后产生3种基因型,分别为TT(不能被酶切,为373 bp 1条带)、GG(酶切为289 bp和184 bp 2条带)、TG (酶切为373 bp、209 bp和164 bp 3条带)。 1.3 统计分析 计量资料以(x±s)表示,非正态分布者进行对数转换,组间比较采用成组t检验,并进行相关性分析。计算基因多态性的基因型频率,确认符合Hardy-Weinberg平衡,计算等位基因频率,基因型分布作Hardy-Weinberg吻合度检验。等位基因频率和基因型频率的比较采用χ?2检验。 2 结果 2.1 一般项目比较 校正年龄和性别后,肥胖组血压、BMI均显著高于对照组,差异均有统计学意义。见表1。 2.2 实验室检测指标比较 校正年龄和性别后,空腹血糖2组差异无统计学意义;血三酰甘油、空腹胰岛素、血清脂联素水平和HOMA-IR差异均有统计学意义。见表2。 2.3 双能X线吸收法检查体脂含量及分布情况 校正年龄和性别后,总体脂和躯干部体脂百分比2组比较差异有统计学意义(P [2] GORD