脂肪源性干细胞内分泌功能及再生医学探究进展.docVIP

脂肪源性干细胞内分泌功能及再生医学探究进展2001年，Zuk 等[1]首次从人脂肪组织中分离获得一群具有多向分化潜能的细胞――脂肪源性干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)以来，学者们在研究其多分化潜能的同时也开始关注其内分泌功能。现就ADSCs的内分泌功能以及在再生医学和组织工程的应用做一综述。 1ADSCs的内分泌功能 1.1促血管化作用：近年来，大量的研究表明ADSCs可以产生和分泌多种促血管化的细胞因子（如VEGF、HGF、bFGF等），并参与了组织损伤修复的血管化过程[2-4]。Li等[5]在分离培养ADSCs过程中,用ELISA检测到ADSCs分泌大量的VEGF、HGF、SDF-1α，并发现它可通过促进内皮细胞增殖和抑制凋亡来加速血管化。目前，在多种组织缺血模型的研究中也发现移植ADSCs 可改善缺血情况[6-7]。Lu等[8]将标记有Dil的ADSCs注入小鼠任意皮瓣基底部，7天后发现其皮瓣成活率明显高于对照组。用体内成像技术和免疫组织化学方法观察到在注入ADSCs的皮瓣基底部形成较高密度的毛细血管网，同时在新生血管周围发现有标记Dil的血管内皮细胞生成,其机制可能为ADSCs直接诱导分化为血管内皮细胞；另一方面分泌促血管化因子以加速血管化。 同样, Shigemura 等[9]在研究ADSCs 对肺气肿肺泡重建的作用时发现ADSCs可分泌多量的HGF，移植ADSCs 4 周后可观察到上皮增殖和血管增加,恢复了肺气肿损害的肺功能。这也进一步表明ADSCs分泌的促血管生长因子具有强大的促血管化能力, 在局部微环境的诱导下，参与了损伤组织的再血管化过程。 1.2 造血支持作用:体内外研究表明[10-11]，骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有支持造血的作用，共移植BMSCs与造血干细胞（HSC）可以促进HSC的增殖与分化，其原因可能是BMSCs可分泌促造血的细胞因子，对HSC的体外扩增及体内促HSC的造血重建均有积极作用。目前，已有学者关注ADSCs的造血支持作用。Cousin等[12]将ADSCs注射给被致死量（10GY）照射过的小鼠,受体小鼠造血功能可完全恢复，并能在小鼠体内检测到供体细胞。由此可见，ADSCs同样也具有造血支持作用。然而其机制是否为ADSCs分化为造血细胞，还是ADSCs分泌大量促造血的细胞因子，或者为两者兼发挥作用，尚不清楚。 2007年,Kilroy等[3]的研究进一步证实ADSCs造血支持功能与其分泌和表达大量与刺激造血有关的细胞因子，如粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、粒细胞-巨嗜细胞集落刺激因子（GM-CSF）、巨嗜细胞集落刺激因子（M-CSF）、IL-7、以及Flt3配体等密切相关。此外，ADSCs表面表达与分泌大量参与细胞粘附的受体分子，在ADSCs与造血粘附和相互作用中发挥重要作用[13]，如已有体外细胞粘附试验发现，CD34+ 造血细胞与细胞外基质和基质细胞结合时的整联蛋白有依赖性。 目前，尽管有学者分别研究比较骨髓、脐带血和脂肪组织来源的间充质干细胞(MSC)的造血支持作用时，发现ADSCs的作用不及前两者[14]，但鉴于ADSCs取材方便，来源丰富，低免疫性等诸多优点，故在移植治疗中比BMSCs可能更具有优势。 1.3 抗凋亡作用：Sadat等[4]应用Transwell共培养新生鼠心肌细胞和ADSCs时发现ADSCs有保护心肌细胞的作用。进一步采用SiRNA技术研究显示ADSCs所分泌的IGF-I和VEGF发挥抗凋亡的作用。也有学者[5]用ELISA法检测发现ADSCs分泌的基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α），并体外试验证实SDF-1α能刺激内皮细胞增殖，同时可以抑制TNF-α诱导的细胞凋亡，以提高内皮细胞的生存率。其体内机制可能为SDF-1α一方面能通过上调VEGF的表达而发挥作用；另一方面能促进外周血中CD34+ 细胞增殖，抑制其凋亡。其抑制凋亡机制在于激活PI3-K/Akt通路，调节bcl-2蛋白表达[15]。bcl-2基因及蛋白上调被公认是细胞逃避凋亡的一条重要机制[16]。并且试验中发现应用条件培养液的ADSCs试验组内皮细胞的bcl-2 mRNA表达上调，故推测ADSCs所分泌的细胞因子可能通过bcl-2 家族蛋白来发挥抗凋亡作用。 1.4 趋化作用：ADSCs除了表达和分泌与BMSCs相同的粘附分子和细胞因子，如M-CSF、GM-CSF、TNF-α，以及IL-8等促进造血外，还能通过其内分泌因子归巢静脉输注的HSC归巢至骨髓。目前，已证实ADSCs和BMSCs都能够合成和分泌趋化因子SDF1[5,17]。而在机体的发育过程中，HSC归巢至骨髓主要依赖于SDF1与其受体C