4种玉米自交系幼胚遗传再生体系的建立.pdfVIP

—６６ — 江苏农业科学 ２０１６年第４４卷第１０期 楚海娇，李 闯，关淑艳．４种玉米自交系幼胚遗传再生体系的建立［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（１０）：６６ ６８． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２ １３０２．２０１６．１０．０１４ ４ 种玉米自交系幼胚遗传再生体系的建立 楚海娇 ，李 闯 ，关淑艳１ ２ ３ （１．吉林农业科技学院生物工程学院，吉林吉林 １３２１０１；２．吉林农业科技学院，吉林长春 １３６１０５； ３．吉林农业大学生物技术学院，吉林长春 １３０１１８） 摘要：选取４种玉米自交系Ｈ９９、Ａ１８８、７９２２ 和１３２２ 的幼胚作为外植体，接种于１０种不同诱导培养基上，诱导愈 伤组织并建立遗传再生体系，同时探讨了不同基因型、培养基种类、幼胚大小、蔗糖浓度、激素浓度和配比对愈伤组织 诱导率的影响。结果表明：基因型对愈伤组织诱导率高低影响显著，４种基因型玉米幼胚在诱导培养基中均产生了愈 伤组织，但继代培养后只有Ｈ９９ 能诱导出胚性愈伤组织，诱导率为４６．２％；对于不同基因型培养基诱导效果依次为 Ｎ ＞ＭＢ＞ＭＳ；选择幼胚长度为１．５～２．０ｍｍ、添加蔗糖浓度为３０ｇ／Ｌ、２，４ Ｄ 浓度为２．０ｍｇ／Ｌ及 ＡｇＮＯ 浓度为 ６ ３ １０ｍｇ／Ｌ 时玉米愈伤组织诱导率最高且质量较好。 关键词：玉米；再生体系；自交系；愈伤组织诱导率 中图分类号：Ｓ５１３．０３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２ １３０２（２０１６）１０ ００６６ ０３ 我国是世界玉米大国，玉米作为重要的粮、饲作物对我国 １．１ 材料 经济发展和市场稳定具有举足轻重的作用［１］。可以通过基 优良玉米自交系Ｈ９９、Ａ１８８、７９２２ 和１３２２ 的幼胚。 因工程手段改良玉米的品种和农艺性状，而建立高效的体细 １．２ 培养基 胞再生体系是遗传转化的关键。玉米优良基因型遗传再生体 １．２．１ 诱导培养基 本试验设计了１０种基本培养基进行愈 系的建立一直是人们研究的热点［２］。玉米首次诱导出愈伤 伤组织的诱导研究（表１）。 组织是Ｌａｒｕｅ在１９４９ 年用甜玉米的胚作为外植体，但未获得 表１ 诱导培养基及其成分 再生植株。直到 １９７５ 年，Ｇｒｅｅｎ 等用Ａ１８８ 的未成熟胚作外 成分（ｍｇ／Ｌ） 培养基 植体，诱导出二倍体愈伤组织，并获得再生植株，从而得到了 基本培养基 ２，４ Ｄ 硝酸银 ６ ＢＡ 第１ 株无性系植株［３］。目前，已能从多种外植体中诱导出愈 Ｎ６１ 诱导Ｎ６ １ ０ ０ 伤组织，并再生植株。而以玉米幼胚为外植体进行培养，诱导 Ｎ６２ 诱导Ｎ６ ２ ０ ０ 愈伤组织的效率高、再生能力强，可大大提高育种效率。玉米 Ｎ６３ 诱导Ｎ６ ３ ０ ０ Ｎ６４ 诱导Ｎ６ ４ ０ ０ 组织培养的影响因素较为复杂，一些优良自交系的组织培养 Ｎ６５ 诱导Ｎ６ ２ １０ ０ 还存在一定困难。本试验设计了 １０ 种不同诱导培养基对４