肠缺血再灌注中MAPKs信号转导通路.docVIP

肠缺血再灌注中MAPKs信号转导通路肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion，IIR)损伤是常见的组织器官损伤之一，它在严重感染、外伤、休克、心肺功能不全、器官移植等的过程中起重要作用。其机制主要为缺血一段时间后，组织适应了低氧环境的新陈代谢，血流的回复导致激活血管内巨噬细胞，继而相应的生成活性氧自由基(ROS)，ROS又诱发内皮损伤，以及原炎性因子(pro-inflammatory cytokines)的激活，引起一系列细胞信号因子的激活，从而引起氧化损伤［1］。IIR不仅可引起消化道局部组织损害，而且其导致远处器官的损害更为严重，甚至引起多脏器功能衰竭(MODS)，以肺损伤引起的呼吸窘迫综合征(ARDS)最为突出。IIR损伤的信号转导机制很复杂，至今其发病机制并不完全明了，本文介绍MAPKs细胞凋亡的信号转导通路机制。 1 MAPKs与肠缺血再灌注 丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activatedproteinkinases，MAPKs)是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。研究证实，MAPKs信号转导通路存在于大多数细胞内，在将细胞外刺激信号转导至细胞及其核内，并引起细胞生物学反应(如细胞增殖、分化、转化及凋亡等)的过程中具有至关重要的作用。目前已发现存在着多条并行的MAPKs信号通路，不同的细胞外刺激可使用不同的MAPKs信号通路，通过其相互调控而介导不同的细胞生物学反应［2，3］。 MAPKs是细胞内重要的信号传递者，参与了多种生理过程的调节。 目前在哺乳动物体内共鉴定出4个MAPK亚家族,包括:细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal regulated kinases,ERKs)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38:mitogen actirated protein kinase，P38)、C-Jun N末端激酶/应激活化蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinases/stress activated protein kinases,JNKs/SAPKs)、ERK5/大丝裂素活化蛋白激酶1(big MAP kinase 1,BMK1)［4，5］。 1.1 细胞外信号调节蛋白激酶ERK(extracellular signal-related kinase)是重要的信号转导途径之一，可以调节细胞的多种生理功能,ERK是上世纪80年代末期发现的一类丝/苏氨酸蛋白激酶，是传递丝裂原信号的信号转导蛋白。它正常定位于胞浆，有丝分裂原刺激后部分类型的ERK能向细胞核转位，并具有调控转录活性的能力，调节转录因子活性，产生细胞效应。经人工克隆和序列测定分析，已知 ERK 家族有 5 个亚族，包括:ERK1~ERK5。ERK1 和 ERK2 途径是 ERK 家族中研究最彻底的，在经典的三级MAPK顺序激酶激活后出现ERK级联反应。活化的Raf(MAPK激酶的激酶，MAPKKK)可使MEK1/2(MAPK激酶，MAPKK)磷酸化并激活，随后经过双磷酸化使ERK1/2激活。 ERK信号转导通路的大致模式为:生长因子、紫外线、营养因子等→Ras→Raf→MEK1/2→ERK→有丝分裂、分化［6，7］。 1.2 Ras蛋白 Ras蛋白作为Raf-MEK-ERK途径的上游蛋白，是最早发现的小G蛋白，为癌基因Ras的产物，具有活化态的GTP结合构象与失活态的GDP结合构象。Ras受许多刺激因子的激活，如EGF、TNF、PKC的激活物及Src家族成员等。当胞外信号与受体结合后，生长因子受体结合蛋白2(Grb2)，作为接头分子，与激活的受体结合，再与SOS(son of seven-less)的C端富于脯氨酸的序列相互作用形成受体-Grb2-SOS复合物。SOS与受体或受体底物蛋白上的Tyr磷酸化位点结合导致胞浆蛋白SOS向膜转位，并在Ras附近形成高浓度的SOS，SOS与Ras-GDP结合，促使GTP取代Ras上的GDP，使Ras由失活态转变为活化态，激活Ras，启动Ras通路［8］。 1.3 Raf Raf是40~75kD的Ser/Thr蛋白激酶，它有三种类型:Raf-1、A-Raf、B-Raf，其中Raf-1是研究最广泛也是功能最多的激酶。Ras作为其上游激活蛋白，利用高亲和力和Raf-1 N-端的两个区域(RBD和CRD)结合后，将Raf从胞浆转移到胞膜，在胞膜上Raf被激活，但Raf的激活机制现在仍不清楚，只知与Raf的丝/苏氨酸的磷酸化有关［8］。例如，Ras通过激活磷酯酰肌醇3激酶PI3K，它的磷脂化产物又能激活Rac蛋白(一种小G蛋白)，Rac再连接和激活PAK(p21cdc42/rac1激活的丝/苏氨酸激酶)［9］，P