MCP-1ERK信号通路参与骨癌痛的影响机制.pdf

MCP-1/ERK 信号通路参与骨癌痛的作用机制 中文摘要 MCP-1/ERK 信号通路参与骨癌痛的作用机制 中文摘要 第一部分：鞘内注射MCP-1 中和抗体缓解大鼠骨癌痛 目的 观察鞘内注射 MCP-1 中和抗体后，骨癌痛大鼠行为学变化与脊髓背角 P-ERK1/2 表达变化，并探讨其可能机制。 方法 雌性SD 大鼠40 只，体重180～220g ，随机分为5 组(n=8) ：Ⅰ组为假手 术组，于大鼠左侧骨干骺端骨髓腔内注射 10μl Hanks 液；Ⅱ组为骨癌痛组，于左侧 7 骨干骺端骨髓腔内注射10μl （1×10 /ml ）Walker256 肿瘤细胞；Ⅲ组为假手术+MCP-1 中和抗体组，于大鼠左侧骨干骺端骨髓腔内注射10μl Hanks 液，在注射Hanks 液后 3 -1 第7~9 天鞘内注射MCP-1 中和抗体，每天1 次，每次10μl，浓度为10 mg·L 。Ⅳ组 7 为骨癌痛+对照 IgG 组，于左侧骨干骺端骨髓腔内注射 10μl （1×10 /ml ）Walker256 肿瘤细胞，在注射肿瘤细胞后第7~9 天鞘内注射对照IgG ，每天1 次，每次10μl，浓 3 -1 度为 10 mg·L 。Ⅴ组为骨癌痛+MCP-1 中和抗体组，在注射肿瘤细胞后第7~9 天鞘 3 -1 内注射MCP-1 中和抗体，每天1 次，每次10μl，浓度为10 mg·L 。观测造模前、术 后 1、3、6、7、8、9 天大鼠机械性痛觉超敏Von Frey 阈值以及鞘内注射MCP-1 中 和抗体对大鼠Von Frey 阈值和脊髓背角P-ERK1/2 表达的影响。 结果 与Ⅰ组和Ⅲ组相比，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组大鼠MWT 在第6~9 天下降，脊髓 背角P-ERK1/2 阳性细胞数及其蛋白表达增加（P0.0 1）；与Ⅱ组和Ⅳ组相比，Ⅴ组大 鼠术后第7~9 天鞘内应用MCP-1 中和抗体可减轻骨癌痛引起的机械痛敏，减少脊髓 背角P-ERK1/2 阳性细胞数及下调P-ERK1/2 蛋白表达（P0.0 1）；Ⅰ组和Ⅲ组、Ⅱ组 和Ⅳ组上述指标比较差异无统计学意义（P0.05 ）。 结论 鞘内注射MCP-1 中和抗体可以部分缓解骨癌痛大鼠的机械性痛觉超敏， 这种效应可能与抑制P-ERK1/2 的表达有关，提示脊髓MCP-1/ERK 信号途径可能参 与大鼠骨癌痛的形成。 I 中文摘要 MCP-1/ERK 信号通路参与骨癌痛的作用机制 第二部分：鞘内注射U0126 对骨癌痛大鼠痛敏的影响 目的 探讨鞘内注射U0126 对骨癌痛大鼠痛觉过敏以及脊髓背角CX3CR1 表达 的影响。 方法 雌性未交配SD 大鼠50 只，体重150~180 g，采用随机数字表法，随机分 为5 组（n=10 ）：假手术组 （Ⅰ组）、骨癌痛组 （Ⅱ组）、假手术+ERK 拮抗剂U0126 组（Ⅲ组）、骨癌痛组+5%DMSO 组 （Ⅳ组）、骨癌痛+ERK 拮抗剂U0126 组 （Ⅴ组）。 左侧胫骨骨髓腔内接种Walker256 乳腺癌肿瘤细胞建立骨癌痛模型。Ⅲ组、Ⅴ组术后 第10~12 天鞘内注射U0126 10μg/10μl，1 次/d ，Ⅳ组鞘内注射等体积5%DMSO，于 术前及术后第 3、6、9、10、11、12 天给药后测定大鼠机械性缩爪阈值。术后第 10 天给药前及给药后0.5h、1h、3h、6h、9h、12h、24h 测定机械性缩足反射阈