化疗药物对血液肿瘤患儿肠道菌群影响和微生态调节剂干预作用的研究.pdf

中文摘要 摘 要 目的：感染是血液肿瘤患儿最常见的合并症和重要死因之一。据统计 60％--,70％的白血病／淋巴瘤患者死于感染。由于恶性肿瘤患儿化疗后骨髓 抑制明显和中性粒细胞减少，加之免疫力低下，引起感染的机会增多，常 成为患儿病情加重、治疗失败、甚至导致死亡的主要原因，严重影响了恶 性肿瘤的治疗和预后，故查找并分析感染的途径及病因成为临床儿科医师 必须面对的问题。而肠道是机体最大的细菌和内毒素储存库，正常情况下 机体与正常菌群之间保持着动态的微生态平衡，以双歧杆菌为主的专性厌 氧菌与肠粘膜表面特异性受体相结合，形成相当稳定的菌膜结构，构成抗 定植力的生物屏障，可有效抵抗细菌对机体的侵袭，在维持肠道结构和功 能中起重要作用。一旦这种生态平衡和生物屏障被破坏，就可使大量的细 菌和内毒素经门脉系统进入体循环造成肠源性内毒素血症和细菌纵向易 位，并在一定条件下激发细胞因子和其他炎性介质的连锁反应引起全身器 官的损害。因此对恶性血液肿瘤患儿肠道菌群的定量分析有助于了解疾病 本身及化疗药物对肠道菌群的影响程度，从微生态的角度分析化疗药物与 肠道菌群变化的相互关系，并为微生态调节剂用于感染和化疗副作用的预 防及治疗提供依据。 微生态调节剂是根据微生态学原理，通过调整微生态失调，保持微生 态平衡，提高宿主的健康水平，利用对宿主有益的正常微生物或促进物质 所制成的制剂，包括益生菌及其代谢产物和生长促进因子。微生态调节剂 能直接补充机体的正常菌群或选择性刺激正常菌群的生长繁殖，从而竞争 性地抑NJI-源性致病菌及内源性条件致病菌的过度生长及定植，有效地防 止内源性感染的发生及发展。目前在临床上微生态调节剂主要应用于腹泻 病及肝脏疾病的治疗，在小儿血液恶性肿瘤化疗过程中预防性应用微生态 定量PCR技术对恶性肿瘤患儿在化疗过程中不同骨髓抑制程度肠道中大 肠杆菌和双歧杆菌的变化进行定量分析，并与健康组和干预组进行比较， 中文摘要 以了解化疗中不同骨髓抑制程度患儿肠道内大肠杆菌和双歧杆菌的变化 状态、以及微生态调节剂对化疗患儿肠道菌群状态的影响情况，探讨微生 态调节剂对于维持化疗过程中恶性肿瘤患儿肠道菌群平衡的干预作用。并 以期利用这种作用减少或减轻恶性肿瘤患儿化疗过程中各种肠源性感染 发生的机会，从而保证化疗的顺利实施，提高治疗水平，延长患儿的生存 期。 方法： 1 分组 选择河北医科大学第四医院及河北省儿童医院血液科收治的恶性肿 白血病用CAM、DAE等方案，并随机分为两组，一组为观察组，一组为 干预组，另随机选择某小学正常儿童20例作为健康对照组。干预组于化疗 当天开始口服微生态调节剂一双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(金双歧)，剂 量按药品说明书规定剂量口服，至骨髓抑制Ⅳ级时停止。以上三组中：观 性别比较均无差异(PO．05)，以上选择对象2周内均无抗生素应用史及胃 肠疾病史。 2标本 每组中患儿每人分别留取骨髓抑制为0级、II级、Ⅳ级时粪便标本，O 级取化疗前粪便，用无菌离心管收集，编号后置．80℃冰箱保存备用。‘ 2．1肠道细菌DNA的制备按照粪便细菌基因组DNA提取盒上的操作说明 提取粪便标本中细菌DNA及标准菌株DNA．。 2．2常规PCR反应对提取的细菌DNA进行定性分析。 2．3荧光定量PCR反应，绘制溶解曲线，制作标准曲线及定量分析。 结果： 1对照组、观察组和干预组粪便标本中双歧杆菌数量的对数值比较 对 照组双歧杆菌数量的对数值为9．23±O．59，观察组O、II、Ⅳ级骨髓抑制 预组O、II、Ⅳ级骨髓抑制时双歧杆菌数量的对数值分别为7．184-0．44、 中文摘要 菌数量的对数值较对照组明显减少，有显著差异(尸O．05)；观察组和干 预组O级骨髓抑制时双歧杆菌数量的对数值之间无显著差异(尸O．05)； 观察组和干预组II、 Ⅳ级骨髓抑制时双歧杆菌数量的对数值之间比较均 有显著差异(尸O．05)。 2对照组、观察组和干预组粪便标本中大肠杆菌数量的对数值比较 对 ±O．2l；干预组O、II、Ⅳ级骨髓抑制时大肠杆菌细菌数量的对数值分别 肠杆菌细菌数量的对数值较对照组大肠杆菌数量有显著差异(尸O．05)； 观察组和干预组在O级骨髓抑制时大肠杆菌细菌数量的对数值之间无显 著差异(PO．05)；观察组和干预组II