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含PMLRARa及ABL双基因质粒标准品的制备及检测PMLRARa基因的双重荧光定量PCR方法的建立
摘要
摘要
研究目的：
1．获得稳定，准确的含PML／RARa和ABL双基因质粒标准品
2．建立检测PML／RARa和ABL基因双重荧光定量PCR方法。
3．开发出可应用于临床急性早幼粒白血病病人PML／I{ARa基因检测试剂
盒。
方法：
RARa中(该质粒Eh上海交通大学血液学研究所张小伟博士惠赠)送去测序。测序
性能进行评价。
2．构建稳定的检测PMI，／RARa和ABL基因的单重荧光定量PCR反应体系，
同时在此基础之上建立稳定双重荧光定量PCR方法，开发出可应用于临床检测
白血病病人PML／RARa检测的试剂盒。
实验结果：
1．成功构建了含PMI，依ARa和ABL双基因质粒标准品，用于白血病病人
PML／RARa基因的定量检测。
2．成功开发出用于临床检测白血病病人PML／RAIh基因的单重以及双重荧
光定量PCR反应试剂盒。
结论：
1．含PML瓜p幽和ABL双基因质粒标准品性质稳定，能用于白血病病人
PML／RARa基因的准确定量。
2．对检测PML／RARa基因的单重以及双重荧光定量PCR反应体系进行性能
评价，开发出了稳定的定量检测试剂盒。
关键词：荧光定量PCR；PML／RARa；ABL；急性早幼粒细胞白血病
I【
Abstract
ABSTRACT
Objective：
1、toconstructarecombinant and
plasmidcontaining
PML／RARa(L)fusiongene
referenceABL．
gene
2、constructionof real—time PCRmethodsto
duplex quantitative detectPML／RA
andABL
Ra(L)fusiongene gene．
3、to aPML／RARafusiondetectionboxto
develop gene reagent acute
diagnosis
leukemia．
promyelocytis
Methods：
1、TotalRNAwasextractedfromtheNB4
cells RT-PCR．Toclone
using ABL
intothe wasobtainedfrom
gene plasmidPCMV4一PML／RARa(thisplamid Dr．Zhang
XiaoweiwhoisfromInstituteof Jiao
Hematology,Shanghai
Tong
therecombinantwas to the
plasmidsubjectedsequencing．After
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