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[ 应用纪要] 将USP GC方法转换为合相色谱方法：分析颠茄 Paula Hong 和 Pat McConville 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德市) 应用优势 简介 ■ 2 UPC ™，作为气相色谱法的正交分 颠茄是一种原产于欧洲南部和中部、非洲北部以及东亚地区的多年生 离技术，适用于分析热不稳定的 植物。几个世纪以来，颠茄提取物一直用于治疗多种疾病，包括溃疡 化合物 和其它胃肠功能紊乱，以及疼痛。它也是一种抗毒蕈碱药剂。 该提取 物主要由莨菪烷类生物碱、东莨菪碱和莨菪碱(阿托品)组成，这些成 ■ 高通量，可在5 min内完成稳定分 析 分不仅具有药效，也具有较高的毒性。这种利弊两面性使得提取物中 这些生物碱的定量在安全性方面显得尤为关键。 ■ 线性动态范围为10-400 µg/mL 目前，美国药典委员会(USP)方法针对颠茄提取物指定了一种气相色谱 ■ UPC2方法与用于鉴定未知组分的 (GC)方法，该方法采用1.2×4.0 mm的玻璃柱，其中由涂覆3% G3的S1AB填 质谱法兼容 充，以氦气作为载气。 样品制备中需使用高挥发性的二氯甲烷作为稀 释液。 虽然此类分析物一般采用直接进样的方式，但是GC分析时所需 的高温可能会导致东莨菪碱和阿托品脱水和转化为它们的载脂蛋白形 式。1 2 通常情况下，这些问题可通过衍生化反应解决。 本应用纪要证 明USP方法可成功转换为合相色谱法。本实验采用超临界二氧化碳(CO2) 作为流动相，结合改性剂和添加剂，建立了一种可靠的定量方法用以 替代GC，此外还提高了样品稳定性并简化了样品制备过程。 阿托品 东莨菪碱 沃特世解决方案 图1. 阿托品和东莨菪碱的结构。3 配备PDA和SQD检测器的ACQUITY 2 UPC 系统 2 ACQUITY UPC BEH 1.7 µm色谱柱 Empower® 3 软件 关键词 UPC2 ，合相色谱法，生物碱， 气相色谱法，USP方法转换 1 [ 应用纪要] 实验 样品描述 柱温： 50 ℃ 氢溴酸东莨菪碱(CAS号114-49-8)、阿托品 样品温度： 15 ℃ 游离碱(CAS号51-55-8)和氢溴酸后马托品 (CAS号51-56-9)标准溶液均以异丙醇为溶 ABPR： 2000 psi(138 bar) 剂。 所有储备液浓度均配制为1 mg/mL。 对储备液进行超声处理，确保溶解。 采 进样体积： 1 µL 用东莨菪碱和阿托品储备液依次制备浓度