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鲤微卫星引物对麦穗鱼的适用性初步研究-水生生物学报

第31卷 第2 期 水 生 生 物 学 报 Vol.31, No .2 2 0 0 7 年 3 月 ACTA HYDROBIOLOGICA INICA Mar., 2 0 0 7 研究简报 鲤微卫星引物对麦穗鱼的适用性初步研究 马洪  岳永生 于 艳 郭金峰 王 慧 (山东农业大学动物分子遗传育种实验室, 泰安 271018) APPLICABILITY OF MICROSATELLITE PRIMERS DEVELOPED FROM CARP IN PSE UD ORASBORA PAR VA MA Hong-Yu,YUE Yong-heng,YU Yan,GUO Jin-Feng and WANG Hui (Lab of Molecular Genetics and Animal Breeding, Shandong Agricultural University, Taian  271018) 关键词:微卫星;麦穗鱼;遗传多样性 Key words:Microsatellite;Pseudorasboraparva;Genetic diversity 中图分类号:Q959  文献标识码:A  文章编号:1000-3207(2007)02-0278-04   麦穗鱼(Pseudorasboraparva Temminck et chlegel)是淡水 1 材料与方法 中广泛分布的小型鱼类, 属鲤科(Cyprinidae)、 亚科(Gobion- inae)、麦穗鱼属(Pseudorasbora Bleeker)。常见于中国东部地 1.1 材料 麦穗鱼共40 尾, 于2004 年12 月11 日采集于山 区各大水系, 朝鲜、日本也有分布。开展小型鱼类种群遗传 东东平湖。 多样性研究, 能为合理开发利用小型鱼类资源, 发展鱼食性 1.2 方法 基因组 DNA 提取提取方法见参考文献[4]。 鱼类增养殖, 优化湖泊渔业结构提供重要的基础资料。张堂 PCR反应体系:DNA 模板0.7μL;上下游引物各 0.6μmol/L; [1] # Mg2+浓度见表 1;dNTPs 200μmol/L;Taq DNA 聚合酶0.625U; 林等 于1995 年10 月至1996 年11 月对保安湖1 试验围栏 中麦穗鱼的种群数量作了 11 次估算, 并对种群的动态特征 10×PCR buffer 2.5μL;补充灭菌双蒸水至终体积25μL。94 ℃ [2] 预变性4min, 94 ℃变性 30s, 退火(温度见表 1)50s,72 ℃延伸 进行了分析。何舜平等 利用 RAPD 技术, 采用 20 个随机 引物对五种鲤科鱼类进行研究, 结果表明麦穗鱼与草鱼之间 50s, 30 个循环;再于72 ℃延伸7min。扩增产物用12%的非 的遗传距离最近, 而与唐鱼之间的遗传距离最远。 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测, 银染, 数码相机拍照保存。 目前, 尚无微卫星标记在麦穗鱼基因组中分离与应用的 回收步骤见参考文献[5]。产物纯化采用宝生物工程(大连) 研究报道。对于大多数物种而言, 应用微卫星标记首先必须 有限公司的PCR Fragment Recovery Kit (Ver.2.0)试剂盒。 分离出微卫星位点并设计微卫星引物。而传统的微卫星分 所有操作均按说明书进行。产物测序由上海英俊生物有限 离方法必

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