七氟烷后处理对大鼠在体心脏缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的作用.pdfVIP

山西医科大学硕士学位文 七氟烷后处理对大鼠在体心脏缺血再灌注损伤 心肌细胞凋亡的影响 摘 要 目的 ①通过对大鼠在体心肌细胞凋亡的检测及凋亡相关蛋白 Bax 和 Bcl-2 的测定， 观察七氟烷后处理对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用。 ②通过在大鼠心肌缺血再灌注后给予七氟烷，进一步探索不同浓度七氟烷后处理的效 果。 方法 健康 Wistar 雄性大鼠 60 只，体重 200-250g ，由山西医科大学生理动物室提供， 随机分为 5 组，每组 12 只，P 组：假手术组；IR 组：缺血再灌注组；S 组：1%七氟烷后 1 处理组；S2 组：2%七氟烷后处理组；S3 组：3%七氟烷后处理组。采用结扎左冠状动脉前 降支 （LAD ）的方法建立心肌缺血再灌注模型。P 组仅穿线但不结扎 LAD 。IR 组心肌缺血 45min 再灌注 3h。七氟烷后处理组分别于再灌注前 15min 吸入浓度为 1%、2% 、3% 的七氟 烷。再灌注结束时快速摘取左心室做标本。光学显微镜下观察心肌细胞形态，免疫组化法 测定心肌细胞 Bax，Bcl-2 蛋白的含量，TUNEL 法检测心肌凋亡指数 （AI ）。 结果 ①光学显微镜下显示：P组心肌纤维排列呈束状。细胞核形态正常，细胞无水 肿，无变性坏死。IR组部分心肌纤维断裂。细胞核有浓缩、溶解、消失现象，心肌细胞呈 现大片状坏死。S组较IR组心肌组织改变减轻。②免疫组化法显示：与P组相比，IR组、各 S组心肌Bax与Bcl-2均显著升高（ ）。与IR组相比，各S组Bax均显著降低（ ）， P  0.05 P  0.05 Bcl-2与Bcl-2/Bax均显著升高 （ ）。S 组与S 组各指标间无明显差异 （ ）。 P  0.05 1 3 P  0.05 与S 、S 组相比, S 组Bax显著降低 （ ），Bcl-2与Bcl-2/Bax均显著升高 （ ）。 1 3 2 P  0.05 P  0.05 ③TUNEL法显示：与P组相比，IR组、各S组AI均显著升高 （ ）。与IR组相比，各S P  0.05 组AI均显著降低 （ ），各S组之间AI无显著差异 （ ）。 P  0.05 P  0.05 结论 ①心肌缺血再灌注损伤能引起 Bax 蛋白表达增加，Bcl-2 蛋白表达下调。②七 氟烷后处理通过减弱 Bax 蛋白表达，激活 Bcl-2 蛋白及升高 Bcl-2/Bax 比值，减轻细胞凋亡， 从而达到心肌保护效应。③不同浓度的七氟烷后处理组均表现出明确的心肌保护效应，同 时2% 的七氟烷后处理优于 1%和 3%组。 关键词 七氟烷后处理；心肌；缺血再灌注损伤；凋亡 I