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- 2017-10-06 发布于天津
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修饰标记引物的介绍.pptx
修饰引物的介绍
储存条件
冻干引物和稀释成储液的引物建议储存在-20°C.
HEX,、TET和FAM对光敏感。应储存在黑暗处或用琥珀色管子储存。推荐放入黑色盒子中。
染料 暴露在光下半衰期(大约)
HEX 4.5 hours
TET 2.25 hours
FAM 1.125 hours
HEX和TET标记的寡核苷酸在PCR 30个循环内都是稳定的;但是在不利的环境中(高PH,高温),TET比HEX稳定。
稀释方法
对于非Cy类的荧光标记引物,建议用TE稀释,浓度高于10uM。
Cy3和Cy5标记的引物在碱性条件下易降解,用中性溶液溶解。
稳定性
冻干的引物在-20°C能够稳定一年。在4度能够稳定几个月。储液在-20°C能够稳定至少六个月,在4度能够稳定几个星期。
AP偶联引物- 放在AP储存液中运输,储存在4度,能够稳定12个月。
HRP偶联引物-放在HRP储存液中运输,储存在4度,能够稳定12个月。
修饰对OD值的影响
有些荧光基团在260 nm处也有吸收光: 这些修饰包括: FAM, Fluorescein, HEX, TAMRA, and TET。其它在260 nm处可能也有吸收值,但是数据没有公布,因此计算时不包括在里面。
AP and HRP偶联的寡核
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