菲律宾蛤仔碱性磷酸酶的分离纯化和性质的分析研究.pdfVIP

菲律宾蛤仔碱性磷酸酶的分离纯化和性质研究 摘 要 碱性磷酸酶(Alkaline 可催化各种磷酸基团的水解和转移反应。在生物体内，ALP广泛参与鱼类葡萄 糖、脂类、无机磷及钙的吸收，维持适当的钙磷比例，并且在贝类动物贝壳形成 过程中起到重要作用。纯化后的ALP被广泛应用在酶免疫分析和基因工程领域。 目前应用的ALP主要是从大肠杆菌、牛小肠中分离纯化得来，但其理化性质存 在局限性，如大肠杆菌最适反应温度为80。C，在25。C条件下没有酶活力；牛小 肠ALP在DNA克隆和扩增中不易热失活等，促使研究者不断探索、发现新来源 的ALP。 鉴于海洋生物其独特的生活环境，海洋生物逐渐成为新型活性物质的珍贵材 料来源。本课题对海洋软体动物菲律宾蛤仔的ALP进行分离纯化，优化ALP分离 纯化工艺，并进一步研究其酶学性质。相关研究内容及结果如下： 1．菲律宾蛤仔体内ALP组织性差异研究表明，酶活性顺序由大到小依次为内脏 团、鳃、斧足和外套膜。对菲律宾蛤仔内脏团ALP活性的季节性差异研究表 明，四个季节中酶活性均较高，但以春节ALP活性最高，夏季次之。 Fast 2．采用硫酸铵盐析沉淀、D