植物生理学大实验 实验一 植物激素对植物形态建成及作用.pptVIP

生物学综合实验模块二 植物生理学大实验 实验一 植物激素对植物形态建成的作用 目的与要求 了解不同比例的生长素和激动素对烟草髓愈伤组织形成和分化的影响，并学习植物组织培养的技术。 原理 植物各器官的分化，首先是细胞的极化过程。植物体的每一个细胞都由受精卵分裂而来，即使高度分化的细胞，也保留着遗传上的全能性，即在每一个细胞中，包含着产生一个完整有机体的全部基因。 在烟草髓组织培养中，激动素和生长素在愈伤组织的形成和分化中，有相互作用。产生大量的愈伤组织，需要有生长素和激动素。在一定浓度范围内，生长素/激动素的比例高时，产生根；生长素/激动素比例低时，产生芽；在二者的比例子居间时，愈伤组织占优势。 材料与设备 一、材料 40-60厘米高、生长健壮的烟草植株二株。 二、设备 高压灭菌锅 培养室 超净工作台 三角瓶（100毫升） 培养皿 手术刀 封口膜 长柄镊子 手术剪 消毒棉 试 剂 各种母液 （1）1毫克/毫升的生长素溶液 （2）1毫克/毫升的激动素溶液 （3）1毫克/毫升维生素B1（盐酸硫胺素）水溶液 （4）20毫克/毫升的肌醇溶液 （5）称取下列试剂，溶于水后定容到250毫升。 H3BO3 0.31克 KH2PO4 8.5克 KI 0.0415克 Na2MoO4·2H2O 0.0125克 CoCl 2·6H2O 0.00125克 （6）称取下列试剂，溶于水后定容到250毫升。 MgSO4·7H2O 18.5克 MnSO4·H2O 0.845克 ZnSO4·7H2O 0.43克 CuSO4·5H2O 0.00125克 （7）称取下列试剂，溶于水后定容到500毫升。 Na2EDTA 1.86克 FeSO4·7H2O 1.39克 愈伤组织诱导培养基（RM-1965培养基） 每一升培养基含有： 母液（5） 5毫升 盐酸硫胺素 0.4毫升 母液（6） 5毫升 生长素 2毫升 母液（7） 10毫升 激动素 0.30毫升 NH4NO3 1.65克 肌醇 5毫升 KNO3 1.9克 蔗糖 30克 CaCl2 0.33克 琼脂 10克 用1M的氢氧化钠调pH至5.6—5.8。每瓶装50毫升，于高压灭菌 锅中灭菌121℃,15-20分钟，冷却后备用。 愈伤组织分化培养基 除生长素和激动素按下面的浓度加入外，培养基的其他成分和浓 度，同RM-1965培养基。培养基分成六个处理，每个处理有五个重复。 生长素浓度（毫克/升） 激动素浓度（毫克/升） （1） 0 0 （2） 0 0.2 （3） 2 0 （4） 2