缺血再灌注对大鼠血脑屏障物质转运的影响.docVIP

缺血再灌注对鼠血-脑屏障的影响 先雄斌综述 袁琼兰2审校 1、四川泸州医学院神经生物学研究室，646000 2、上海同济大学医学院解剖学教研室，200092 血脑屏障(blood-biain barrier ,BBB)是存在于脑组织和血液之间的一个复杂的细胞系统，能控制血、脑两侧的物质转运，从而保证中枢神经组织内环境的相对稳定。血脑屏障受损是脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury，CIR)的重要的病理生理因素。为深入探讨脑缺血再灌注损伤的病理生理机制,国内、外诸多学者对脑缺血再灌注后BBB的物质转运运机制等进行了大量卓有成效的研究。目前有关研究报道很多，现综述如下。 1．血-脑屏障的结构 血脑屏障由中枢神经系统的脑毛细血管内皮细胞(brain capillary endothelial cells，BCEC)、内皮细胞之间的紧密连接(tight junctions，TJ)、基底膜(basement membrane)以及毛细血管周围的星形胶质细胞突起(process of the neuroglial cell)构成。其中血管内皮细胞及其紧密连接是血脑屏障的主要结构,它可以阻止多种物质进入脑,但营养物质和代谢产物可顺利通过,以维持神经系统内环境的相对稳定； 基底膜主要由Ⅳ型胶原、层黏蛋白和纤维连接蛋白构成，它能起到支持作用，防止由于静水压和渗透压改变引起的血管变形；星形胶质细胞对血脑屏障的完整性有诱导和维持作用。 2．血脑屏障的物质转运机制[1] 血脑屏障的物质转运有两种形式：一种是物质从高浓度向低浓度移动不需要能量的被动扩散(Passive dispersa1), 它通过孔穴大小来控制物质在BBB的转运,如细胞间隙的亲脂通路和亲水通路。正常情况下，脑毛细血管内皮细胞的有效孔径为1.4nm-1．8nm，直径小于1．8nm的药物分子可由被动扩散方式穿过BBB。另一种是载体蛋白等参与的需要能量的逆浓度差和(或)逆电化学梯度的主动转运(Active transport)。现有研究表明主动转运有以下转运系统:⑴ 载体介导的转运系统。如己糖转运系统、氨基酸转运系统、单羧酸转运系统、胆碱转运系统胺转运系统、核苷转运系统、红细胞结合转运系统等。⑵特定受体介导的内吞作用。如胰岛素通过内吞作用进入脑内。⑶吸附介导的胞吞转运作用。它是通过物质正电部分与血-脑膜负电部分之间的静电作用，使物质胞吞透过BBB。⑷ 外排转运系统(Efflux transport system)。可主动将毒性代谢物和异源性物质外排，以维持大脑正常的生理功能。β-糖蛋白和有机阴离子转运体被认为是药物BBB外排的主要转运载体。 3.缺血再灌注后对血-脑屏障结构的影响 王兴盛等[2]用线栓法并加以改进制作局灶性脑缺血再灌注模型。脑缺血再灌注24h后迅速断头处死。在缺血侧海马区切取新鲜脑组织处理后经透射电镜观察发现，神经细胞核常染色质疏松，异染色质不规则固缩，并向核周边聚集，核蛋白和胞浆蛋白成分松散、丢失，粗面内质网及核糖体肿胀，部分溶解，溶酶体部分呈板层结构；胶质细胞水肿，星形胶质细胞皱缩，核蛋白和胞浆蛋白成分松散、丢失，粗面内质网致密，突起肿胀，退行性变；微血管内皮细胞出现核皱缩、变性，核染色质松散退变，胞饮小泡增多，血管管腔狭窄。管腔内可见红细胞，内皮细胞间隙增大，通透性增加，胞浆和间质水肿明显；毛细血管内皮细胞有多个向管腔内伸入突起，呈伪足样。徐凯等[3]也发现缺血再灌注时血脑屏障的损伤随着缺血时间的延长而加重：缺血2小时神经细胞胞浆内水肿，线粒体轻度肿胀，髓鞘变性，内皮细胞肿胀，毛细血管基底膜尚完整。缺血6小时间质水肿严重，神经元密度明显减小，神经纤维肿胀明显，细胞坏死更重，神经细胞崩解，髓鞘肿胀明显，线粒体肿胀明显出现嵴断裂；内皮细胞固缩，毛细血管基底膜断裂，毛细血管管腔明显变形狭窄。 4．缺血再灌注对血脑屏障的通透性的影响 王社军等[4]采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型，通过测定脑组织中伊文氏蓝)含量及免疫组化法来观察血脑屏障通透性的改变。结果表明示BBB的通透性改变与缺血后再灌流的时间密切相关，缺血再灌注3 h，BBB的通透性开始增加；再灌注6-12 h，BBB通透性逐渐增加；再灌注24 h，BBB的通透性明显增加，且达高峰；待再灌注72 h及120 h，BBB的通透性逐渐减小。这与Rosenberg等[5]通过测量脑组织中14C-蔗糖的方法对大鼠MCAO 2 h再灌注后BBB通透性研究的结果一致。 5．缺血再灌注后血脑屏障损伤的机制 5．1 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP) 细胞外基质(extracellular matrix，ECM)和血管基底膜与是维持BB