改建重建阴囊皮瓣对兔生精功能影响实验地.pdfVIP

毕业论文 改建重建阴囊皮瓣对卑丸生穗功能影响的实验研究 1．材料与方法 1．1实验动物及分缀 叛弯龄镄瑟瑟兰太囊熊(第三军医大学舅竣终秘研究所提供，会掺证 2。7kg，与雅住家兔熬对务笼袋养证实箕其寄生育戆秀。存_逑生育雯豹装兔36必， 月龄7月～8月，体熏2．5kg～2．7kg。雌雄兔分笼喂养1月，确保雌兔未受孕。 喂养动物饲料有青鼙、黄豆粉、麦麸、玉米耱、骨耪、鱼粉。寝养期闻动物不给 任何外加因豢的影响。由遵义医学院实验动物中心提供饲料并完成喂养。 1．2主要试剂和仪器 鬟微镜，斑缨腿记数教，自剩采集耪渡模其，载玻片，羲玻|垮。HE染色试 剂盒，中性甲醛，二甲苯，光水乙醇，中性树脂封片齐J。 1．3实验穰登熬建纛及手零穷法 皮瓣重建阴囊模型的建妲：将兔子仰卧位固定在手术台上，备皮，消毒；． 切除两铡鬻囊皮肤，子黢箴游帮莰谛双铡约犬手醣囊皮获10*4豹瘦瓣局部转移 覆盏睾丸表灏重建阴囊，皮瓣长宽比约为1．5：l，切敷皮瓣的区域用切取下的阴 囊皮肤游离移植并打包固定覆盖创谳，第7必拆包，第lO天拆线。 皮瓣重建嬲囊修薄改建模型豹建立：在皮瓣模型建立后8周末(15改建翦) 将兔子固定警术台后，于阴囊皮瓣一侧原手术瘢痕切歼，保留蒂部，分离至皋丸 表瑟，锈豫癜痕组织，觅疫瓣矗运夷好，保护好睾丸誉受擐伤，在保涯皮瓣成活 的前提下，锐性切除皮瓣皮下脂肪组织及筋膜，尽量修薄皮瓣，再次检查皮瓣血 运良好，彻底壹盘，缝合讶掰，第lO天拆线。 术后用无菌敷料包扎手术创口，3天后拆除敷料，每日用0．5％碘伏清洗创口 防治倒日感染。局部和全身涞使用抗生素。实验动物光一家兔锄日发生感染． ． 按照皮瓣模型和改建模型的建藏把实验结果观察分为三个时阃点：Tl(皮瓣 模型建立前即正常大白兔)、T2(皮瓣模型建立后8周束即改建模型建囊前)、T3(改 建摸凝建立鬃8周寒)。 1．4精液的采集 分鬟l在菠瓣模受程改建镤墼建纛蔻及建巍嚣s露米蘧瓿联6只采鬃耪滚遴镎 常规分析，3个时段进行两两比较。方法：采用“假阴道法嘲”，将母兔放于雄兔 6 毕业论文 教建重建掰囊皮瓣对睾丸生糖功能影响的实验研究 笼内，待雄兔爬跨母兔时，将已经在4012温水中预热的精液采集模具放于雄兔跨 ml雄兔酶精 下，待雄兔冁弧嘲时寝示采檠成功。该方法一次可皎集0．25m1～2．00 滚。鞲波采集后将攒套密封放入盛商39C发右温水的容器内内迅速送检查。 1．5精液常规检查 1．5。l检查内容 显微镜检查：精子密度、活动力、活动率。 1．5．2试蘩 精予稀释液：碳酸氢钠59，40％甲醛溶液lml，蒸馏水lOOml，待完全溶解过滤后使用。 1．5．3搡俸 ’ (1)．予小试管内加精予稀释液0。38ml，吸液化糟液20ul，加入稀释液内摇匀。 (2)瑰分摇匀后，滴入血细臆计数池肉，静嚣l～2分钟，待稿子下沉精，戳耩子 头部撂为基准进行计数。 (3)．如精子数少，可计数2个犬方格内精子数。总数乘lO万即为每毫升精液内糟子 数，秀换算域x109／L。 (4)．如精予数多，可计数5个中方格内糟子数，总数乘lO万即为每蚰精液内精予数， 霉换算成×lC／L。 1．5．4精予活动力判断 取童述新鲜漩片标本，观察精子的活动力，按下弼4级报告： a级：良好，为抉速直线向褥运动，很快超越一个视翳，运动活泼。 b缀：活动力较好，脊中速运动，糟予里缓慢或呆滞的向前运动，有时略有回旋。 e级：活磁一般，戆乎活动方向不臻确，不黧直线运动，也誉活泼。 ’ d级：无活动力，无向前运动，加漏后仍不活动． l。5，5耪子滔动率诤筹 。 取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜(40X)观察100个精子，计数活动精 予每不活动耩予的院锈，诗筹精予灞动静吾分率。 游动精予数 耢子活动攀= 涌动精子数+不