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No．4 ·496· HeraldofMedicineV01．28 2009 April 天然抗肿瘤药物筛选方法的研究进展 顾琳娜1，顾昊2 (1．浙江省湖州市药品检验所，313000；2．首都医科大学附属北京朝阳医院，北京100020) [摘要]目前发现许多天然药物具有抗肿瘤作用。随着细胞生物学、分子药理学和肿瘤药理学研究的发展，针 对细胞和分子靶点的天然药物已成为当今抗肿瘤药物研究的重要方向。在研究过程中，建立合理的抗肿瘤药物筛选方 法显得尤为重要。详细介绍近年来天然抗肿瘤药物的筛选方法，为抗肿瘤药物的研究与开发提供参考。 [关键词]天然药物；抗肿瘤；筛选方法；分子靶点 [中图分类号】 R282．71；R979．1[文献标识码】 A [文章编号] 肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一，抗肿瘤药物的研究 维持细胞复制能力的作用口1。端粒酶是由RNA和蛋白质组成 与开发在当今的医学领域中具有重大意义。研究表明，许多天 的一种特殊的逆转录酶，其功能是合成端粒DNA，使端粒出现多 然药物都具有抗肿瘤作用，其有效成分通过多靶点、多途径、多 个重复序列从而不断延长旧o。1994年KIM等川通过实验发现， 环节来产生抗肿瘤作用。天然药物抗肿瘤的机制主要包括增 肿瘤细胞中端粒酶活性表达呈阳性，而在正常组织中则无端粒酶 强机体免疫功能、细胞毒作用、抑制肿瘤血管生长、诱导肿瘤细 活性表达或活性很低。此后亦有实验证明端粒酶与恶性肿瘤密 胞分化和逆转肿瘤细胞多重耐药性等…。 切相关，因此端粒酶已成为当前肿瘤治疗的靶点之一【sJ。 随着分子生物学、免疫学、中药药理学及中药提取和分离 孟志强等归1在对健脾理气方(由鳖甲、白术、山楂、党参、白 技术等的发展和成熟，天然药物及其有效成分的研究也随之快 花舌蛇草、枳壳、八月扎、茯苓等组成)进行研究时发现，该方药 速发展。阐明天然药物抗肿瘤作用的途径和靶位点对抗肿瘤 药物的开发有着重要的意义。因此，需要建立合理的抗肿瘤药 抑制作用。LIAN等¨叫的研究结果表明中草药合剂(含茯苓、当 物筛选的方法和系统以及找到更高效、更简便的筛选模型∞J。 笔者对近年来抗肿瘤天然药物的筛选方法综述如下。 1细胞水平筛选抗肿瘤药物 粒酶活性从而导致细胞生存能力的降低。 细胞生物学、分子药理学、分子生物学、生物化学等学科的 3以DNA拓扑异构酶为靶点筛选天然抗肿瘤药物 发展为药物筛选提供了新的方向。细胞水平的药物筛选模型 DNA拓扑异构酶(DNA 具有材料用量少、药物作用机制比较明确和大规模筛选等优 割、转移和再连接来改变DNA的拓扑结构¨¨。DNA拓扑异构 点。目前，在细胞水平上对抗肿瘤天然药物的筛选主要是采用 酶在细胞代谢过程中起着极其重要的作用，如DNA复制、基因 选取几种肿瘤细胞系，以培养细胞为实验模型，用结晶紫染色 转录、DNA重组和有丝分裂等。抗癌药物喜树碱 测定法、四甲基噻唑蓝(Mar)法、SRB法等检测天然药物及其 提取物或单体的体外抗肿瘤作用。 构酶I，吖啶类化合物、鬼臼毒素类化合物、异黄酮类化合物、 温斌等po在研究腹腔注射灰树花提取成分对小鼠免疫功 能的影响时，采用乳酸脱氢酶法、结晶紫染色法、肌’生物活性 测定法等对小鼠脾自然杀伤(NK)细胞和腹腔巨噬细胞进行检的一条或两条链的断裂从而导致肿瘤细胞的死亡¨21。 测，结果表明灰树花乙醇沉淀物(ET—Ire)和RNA提取物显著增 李运曼等¨列通过DNA解螺旋实验评价紫草素对拓扑异构 高了小鼠脾NK细胞杀伤活性、巨噬细胞吞噬功能及肿瘤坏死因 酶I催化活性的抑制作用。结果显示，紫草素可显著抑制拓扑 子(TNF