试验四球菌.ppt

实验四 病原性球菌的检验 病原性球菌，又称化脓性球菌，根据革兰染色性的不同，分为两类： G＋球菌： 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等。 G- 球菌： 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。 『目的要求』 掌握：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的形态及染色特点；葡萄球菌、链球菌的菌落特点及链球菌在血琼脂平板上的溶血性；血浆凝固酶试验、触酶试验的试验方法、结果及意义。 熟悉：脓汁标本的涂片染色与分离培养方法；抗链球菌溶血素O试验的方法、结果及意义。 『内容与方法』 一、病原性球菌形态及培养物的观察（示教） 1、形态观察： 2、培养物观察： （1）葡萄球菌普通琼脂平板培养物： （2）链球菌血琼脂平板培养物: 二、脓液标本的分离培养与鉴定（操作） 1、标本采集：脓液 2、检验程序： 脓液 ↓ ↓ 直接涂片 分离培养 革兰染色镜检 （操作）（血琼脂平板） ↓ ↓ 37℃ 18～24h 初报 挑取可疑菌落（性状、色素、溶血） ↓ 鉴定试验及药敏试验 ↓ ↓ ↓ ↓ 革兰染色镜检 生化反应鉴定 其他鉴定 药敏试验 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓37℃ 18～24h 报 告 三、葡萄球菌属生物化学反应： （一）触酶试验（操作） 1、原理： 触 酶 H2O2 H20＋O2 2、方法（略） 3、结果：于0.5min内产生大量气泡者为触酶试验阳性，不产生气泡者为阴性。用于鉴定葡萄球菌和链球菌。 （二）血浆凝固酶试验——玻片法（操作） 1、原理： 血浆凝固酶 纤维蛋白原 纤维蛋白 此试验是区别致病性与非致病性葡萄球菌的重要指标。 2、方法（略） 3、结果：金黄色葡萄球菌为阳性，表皮葡萄球菌为阴性。 四、抗链球菌溶血素“O”的测定（乳胶法，示教） 1、原理：ASO高滴度的血清被适量溶血素“O”中和后，失去了正常水平量的抗体，多余的抗“O”抗体与ASO乳胶试剂反应，出现肉眼可见的，清晰均匀的凝集颗粒（ASO乳胶试剂系羧化聚苯乙烯乳胶与溶血素“O”共价交联的产物）。 2、方法：（略） 3、结果及意义： 规定时间内出现清晰凝集者为阳性，不出现凝集者为阴性。 主要用于风湿热的辅助诊断： 风湿热患者ASO大多在250单位； 活动性风湿热患者ASO一般≥400单位。 『实验报告』 绘出化脓性球菌镜下形态图。 记录脓液标本的分离培养与鉴定程序。 * * 甲 型 溶血性 链球菌 丙型链球菌 乙 型 溶血性 链球菌 *