宫颈癌及HLA等位基因DQB1-03、DR15相关性探究.docVIP

宫颈癌及HLA等位基因DQB1*03、DR15相关性探究 　 作者：夏琳，张菊，陈中灿，白玉杰，罗进，杨浩，阎小君 【Abstract】AIM： To investigate the relationship between the susceptibility to cervical cancer and HLADQB1*03 and DR15 alleles in Shaanxi Province. METHODS: The target DNA fragments of HLADQB1*03 and DR15 alleles (79 and 197bp respectively) were amplified by using polymerase chain reaction of sequence specific primers（PCR-SSP）in cervical cancer patients and healthy control in Shaanxi Province. RESULTS: The frequency of the DQB1*03 allele was significantly higher in cervical cancer patients than that in normal controls, while no significant difference was found in the frequency of the DR15 allele between the patient group and the control group. CONCLUSION: There may be some correlation between the development of cervical cancer and HLA-DQB1*03, and no correlation between the development of cervical cancer and HLA-DR15. 　　【Keywords】 cervix neoplasms；HLA antigens 　　【摘要】目的： 探讨我国陕西地区宫颈癌的发生与人类白细胞抗原（HLA）DQB1*03、DR15等位基因的相关性.方法： 采用序列特异性引物的聚合酶链式反应（PCRSSP）方法，扩增HLA等位基因DQB1*03、DR15的目的DNA片段（分别为79、197 bp），分析两对等位基因在陕西地区宫颈癌患者和正常人中分布频率的差异.结果： 45名宫颈癌患者组中DQB1*03等位基因频率显著高于50名健康对照组，DR15等位基因频率在两组中的分布无显著差异.结论： HLA等位基因DQB1*03可能与宫颈癌的发生具有相关性，DR15可能与宫颈癌的发生不存在关联. 　　【关键词】 宫颈肿瘤；HLA抗原 　　0引言 　　宫颈癌在全世界范围内已成为威胁女性生命的第二大恶性疾病，仅次于乳腺癌.已证实人乳头瘤病毒（human papillomavirus ,HPV）的感染是宫颈癌的重要致病原因，但并非所有感染HPV的妇女都发展为宫颈癌，因此认为其他因素在宫颈癌的发生、发展过程中也可能起着促进作用.因此我们选择HLA等位基因DQB1*03、DR15进行研究，探讨其在陕西地区妇女中的分布特征及对宫颈癌易感性的影响. 　　1对象和方法 　　11对象 　　宫颈癌患者组为西京医院妇产科经病理学检查确诊的宫颈癌患者45例，年龄30~74（平均464）岁；正常对照组为西京医院住院治疗的非宫颈癌患者50例，年龄32 ~71（平均421）岁. 　　 　　12方法 　　121基因组的提取酚氯仿三步法抽提研究对象外周血白细胞基因组DNA. 　　122序列特异性引物（SSP）参照Olerup等［1,2］文献设计合成DQB1*03、DR15等位基因序列特异性引物，引物序列如下： DQB1*03： 上游引物5′GAG AGG ACC CGG GCG GAG T3′，下游引物 5′CTC GCC GCT GCA AGG TCG T3′，扩增片段大小为79 bp；DR15： 上游引物5′TCC TGT GGC AGC CTA AGA G3′，下游引物5′CCG CGC CTG CTC CAG GAT3′；扩增片段大小为197 bp. 　　123特异性PCR扩增选人生长激素（hGH）的保护序列，扩增作内对照引物.引物序列为： 上游引物5′GCC TTC CCA ACC ATT CCC TTA3′，下游引物5′TCA CGG ATT TCT GTT GTG TTT C3′.扩增片段大小为429 bp.PCR反应总体积为25 μL；25 mmol/L dNTP