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幽门螺杆菌及原发性肝内胆管结石关系 　【摘要】 目的 研究幽门螺杆菌(helicobacter pylori，Hp)与原发性肝内胆管结石(primary intrahepatic stones，PIS)之间的关系。方法 采用PCR法检测胆汁及肝内胆管黏膜组织中HpDNA；采用改良fishman法检测β葡萄糖醛酸苷酶(βGlucuronidase,βG)。结果 37例PIS患者胆汁及胆管黏膜行HpDNA PCR检测，总阳性数为26例(70.27%)，而对照组胆汁中HpDNA仅1例阳性，Hp感染率两组之间比较差异有统计学意义(Plt;0.01)。PIS患者有Hp感染者与无Hp感染者外源性βG比较无明显差异，然而内源性βG升高，具有统计学意义。结论 PIS与Hp感染相关，并且Hp可能通过内源性βG途径参与PIS的形成。 【关键词】 幽门螺杆菌； β葡萄糖醛酸苷酶； 胆管结石 【Abstract】 Objective To study pathogenic mechanism of helicobacter pylori (Hp) infection in primary intrahepatic stones (PIS). Methods Hp DNA in bile and mucosa of PIS samples was detected by PCR while activity of βglucuronidase (βG) measured by enzymological method. Results PCR showed that 26 cases (70.27%) had positive HpDNA in bile and bile duct mucosa of 37 cases with PIS; but there was only 1 case with positive HpDNA in the control, with statistical significance upon infection rate of Hp between two groups (Plt;0.01). PIS cases included those infected with or without Hp. There was no statistical difference upon exogenous βG activity but statistical difference upon endogenous βG activity between positive Hp DNA and negative Hp DNA. Conclusion PIS involves Hp infection agents that may accelerate formation of PIS by enhancing activity of endogenous βG activity. 【Key words】 Helicobacter pylori; βGlucuronidase; Intrahepatic stones 胆汁中幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)DNA的发现使得Hp与肝胆疾病的关系成为研究的热点［1-3］。但是，目前关于Hp与原发性肝内胆管结石(primary intrahepatic stones,PIS)之间的关系报道较少。为进一步探讨Hp与PIS之间可能存在的关系，我们设计本实验进行研究。 1 材料与方法 1.1 标本采集 选取病例均排除肝硬化和肝癌等疾病。PIS组37例，其中男22例，女15例；平均年龄49.5岁(33～73岁)。17例为左肝内胆管结石，伴胆管炎者9例；8例为右肝内胆管结石，伴胆管炎者5例；左右肝内胆管结石者12例，伴胆管炎者6例。对照组8例，其中肝血管瘤2例， 胆道损伤1例， 壶腹部周围癌5例。开腹后穿刺抽取肝门部胆管胆汁1 ml立即送需氧、 厌氧和Hp培养， 另取2～3 ml胆汁置灭菌管内， 行肝叶切除者取肝组织及肝内胆管黏膜组织各约 0.5 cm×0.5 cm置灭菌管内， 标本均立即置-80 ℃冰箱保存。 1.2 材料 采用UreA引物，其核苷酸序列为：HpU1，5′CATCTCCCCCCCAACAAATC3′；HpU2，5′TTCACCACACGACCCATA3′，由上海生物工程公司合成和纯化。扩增产物长度为697 bp。βG测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。组织DNA抽提试剂盒购自中美合资优晶生物工程有限公司。 1.3 方法 1.3.1 细菌培养：胆汁和胆管黏膜即刻接种行厌氧菌、需