急性细菌性腹膜炎对豚鼠小肠Cajal间质细胞影响.docVIP

急性细菌性腹膜炎对豚鼠小肠Cajal间质细胞影响 　【关键词】 Cajal,间质细胞；KIT蛋白；小肠；腹膜炎 　　［摘要］目的探讨豚鼠腹膜炎模型中小肠Cajal间质细胞网络的变化情况。方法利用腹腔内注射大肠杆菌和10%BaSO4肉汤佐剂的方法建立腹膜炎模型，冰冻切片和全层铺片并结合KIT免疫细胞化学染色观察。结果腹膜炎12～24 h，腹膜炎症状最明显，在切片和铺片上均可见ICCs明显减少，其中ICMY减少最显著，48～96 h后ICCs的数量逐渐恢复正常，同时豚鼠的腹膜炎反应也减轻甚至康复。结论小肠壁内ICCs在腹膜炎模型中可明显减少，但随着时间延长，ICCs逐渐恢复正常的细胞网络。 　　［关键词］ Cajal 间质细胞；KIT蛋白；小肠；腹膜炎 　　Effects of acute bacterial peritonitis on interstitial cells of Cajal in intestinal wall of the guinea pigs 　　Abstract: ObjectivesTo investigate the changes of interstitial cells of Cajal networks in the guinea pigs model of acute bacterial peritonitis. MethodsPeritonitis models were carried out by injection of bacterium coli and 10% BaSO4 broth adjuvant, ICCs were observed on the frozen sections and wholemount preparation with KIT immunohistochemistry. Results12~24 hours after peritonitis, symptoms of peritonitis were observed and ICCs decreased obviously on both frozen sections and wholemount preparation, especially for ICMY, while 2~4 days later the number and distribution of ICCs restored to normal.ConclusionAcute bacterial peritonitis might lead to temporary loss of ICCs, and it would be soon recovered. 　　Keywords: interstitial cells of Cajal; KIT protein; intestine; peritonitis 　　Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal，ICCs)是100多年前Cajal应用镀银技术和甲基蓝染色，在豚鼠和家兔小肠内显示的一种特殊的间质细胞。在胃肠道根据其存在部位，一般分为4种亚型：ICMY位于环形和纵行平滑肌之间的肌间神经丛周围；ICIM位于环行和纵行平滑肌内；ICDMP位于靠近粘膜下层部位的环行平滑肌内的深部肌神经丛附近；ICSM位于结肠环行平滑肌层的内侧，紧靠粘膜下层的部位。不同亚型间ICCs的形态亦存在一定的差异，如ICMY有2个以上的细长突起，胞核椭圆，胞质较少；而ICDMP胞体细长，胞浆丰富［1］。目前已经证明ICCs是胃肠道自主节律性运动的起搏细胞和兴奋传导细胞［2］，在调节消化管的运动功能方面具有重要作用［3］。 　　腹膜炎是临床上常见疾病，可由多种因素引起，并可导致严重的并发症，同时也包括了胃肠道运动障碍，如肠麻痹等。腹膜炎所引起强烈的炎症反应，可能导致慢波波幅和频率降低，但对胃肠道运动的起搏细胞-ICCs有怎样的作用，目前还尚不完全清楚。本研究采用大肠杆菌液腹腔内注射的方法建立腹膜炎模型，并作KIT免疫细胞化学染色，以观察Cajal细胞的变化。 　　1材料与方法 　　1.1 实验动物分组及试剂 　　45～60 d龄豚鼠12只（第三军医大学实验动物中心提供），雌雄不限。实验动物分为4组：致腹膜炎后12 h组、24 h组、48 h组和正常对照组，每组3只动物。主要试剂：KIT单克隆抗体（1∶100）购自eBIOSCIENCE公司，HRP标记的兔抗大鼠IgG抗体（1∶100）购自DAKO公司。 　　1.2实验方法 　　1.2.1腹膜炎动物模型建立实验前禁食12 h，不禁水，大肠杆菌液（3×108）每100 g体重1 ml，结合10%BaSO4牛肉汤作佐剂每只1