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慢性胰腺炎动物模型探究现状 　【关键词】 慢性胰腺炎；动物模型 慢性胰腺炎(CP)是临床常见病之一。建立CP动物模型对了解本病病因、发病机制及病变过程以及观察疗效具有十分重要的意义。许多学者对CP模型的建立进行了大量的研究。现介绍有关CP动物模型的研究进展情况。 1 饮食诱导法食物诱导法是一种相对成熟的CP造模方法。Su等〔1〕通过食物诱导的方法建立大鼠的慢性胰腺炎模型:采用4 w龄体重约80 g的雄性WBN／Kob大鼠，用特殊饲料颗粒MB3(营养成分比例：蛋白质28.1％、脂肪6％、碳水化合物48.8％)饲养。12 w后，大鼠的胰腺出现间质水肿、炎性细胞浸润、出血、导管上皮细胞和含铁血黄素沉积，这些改变提示腺细胞的退化，部分大鼠胰腺出现轻微的纤维化。16 w后出现较明显的小叶间和小叶内的纤维化及脂肪沉积(空泡样变)，且达到高峰。这些变化到第20～24周并未明显增加。Tsukamoto等〔2〕进一步改进实验方法,给予雄性Wistar大鼠(350～400 g)灌注乙醇和三种级别油脂食物(低脂5%,高脂25%,超高脂35%),第17周时发现喂食高脂、超高脂和乙醇的大鼠20%～30%观察到慢性胰腺炎的形态学特征如脂肪坏死、单核细胞浸润、间质纤维化和腺细胞的萎缩。采用饮食诱导法建立的CP模型与人类CP发生、发展相似,模型可靠，方法简单，CP模型稳定，成功率较高，且采取非侵入性方法，对机体内环境影响小，适合于从分子水平探讨CP的发病机制及评价药物的干预作用。缺点为时间长，缺乏后期并发症的表现。 　　2 蛙皮素注射法 　　蛙皮素是一种胆囊收缩素和胃泌素的肽类似物，可刺激胰腺外分泌，使胰蛋白水解酶分泌大量增加，从而引起胰腺腺泡的自溶。20世纪70年代初开始，蛙皮素主要应用于建立急性水肿型胰腺炎动物模型。后来依据急性胰腺炎的反复发作，逐渐形成CP的病理过程。Neuschwander等〔3〕给小鼠皮下注射蛙皮素，方法为每周2次给大鼠皮下注射蛙皮素50 μg／kg，经过10 w复制出人类CP的典型组织学特征。10 w时光镜下见胰腺间质胶原Sirius 红染色，可见腺叶间和腺泡周围进行性胶原堆积，腺泡萎缩，腺腔隙扩张。Westerloo等〔4〕研究曲格列酮对CP的治疗作用,将小鼠腹腔注射蛙皮素,发现在第7周时小鼠出现CP的特征,如胰腺纤维化、胰腺星状细胞数量增加。此动物模型是研究CP发病机制及其病理生理改变的理想模型，但蛙皮素的成本高。万远太等〔5〕采用体重180～200 g SD大鼠，以50 μg/kg体重腹腔内注射蛙皮素，每周3次，于第8周可观察到纤维组织大量增生，自血管和腺管周围向小叶内伸展，小叶结构破坏，腺细胞空泡样变性，腺管扩张形成“管样复合体”,呈典型CP组织学特征。本种模型适合于复发性CP的研究。 　　3 二丁基二氯化物(dibutyltin dichloride,DBTC)注射法 　　DBTC是一种脂溶性物质,可经肝脏、胆囊排泄至胰管，引起胰管的细胞坏死和上皮增生，进而阻塞胰管。近年关于使用DBTC诱导CP模型的文献明显增多。Merkord等〔6，7〕利用DBTC诱导大鼠制作CP模型:方法是静脉注射DBTC 6～8 mg／kg，观察2～36 w。早期胰腺组织学改变可见纤维化区广泛单核细胞浸润，无胰腺萎缩，但脂肪增多；晚期可见典型的纤维化慢性炎性病变及内分泌损害。Sparmann〔8〕、何新红等〔9〕将DBTC应用于SD大鼠，也成功的诱导大鼠制作了CP模型。DBTC注射造模法符合人CP的病理过程，可用于发病机制的探讨，尤其胰腺纤维化机制的探讨。本法采用单次注射，比较方便，且模型成功率约80％，成本较低，为比较经典的一种造模方法。另外，VeraPortocarrero等〔10〕在DBTC基础上加10%的乙醇饲喂,3 w后产生与人类相似的CP,该模型适合药物治疗研究。 　　4 胰管注射法 　　1998年，Kataoka等〔11〕把黏合剂(成分为玉米蛋白油酸、甘油酯亚油酸)逆性注射至大鼠胰管内(0.05 ml／100 g)制备CP模型。6个月后CP模型形成。Haber等〔12〕用三硝基苯磺酸(TNBS)逆性注射至大鼠胰管内制备CP模型，此模型的胰腺组织中可见胰腺纤维化及胰腺星形细胞激活，证明胰腺星形细胞激活与人类及动物模型胰腺纤维化有关。国内王兴鹏等〔13〕将SD大鼠的胆总管注射TNBS溶液。注射后即刻显示肉眼所见胰腺组织水肿，第4周胰腺组织的表面苍白呈不规则结节状，部分大鼠可见胰腺萎缩。在光镜下第3周可见局限性纤维化，第4周见典型的病理学改变，即胰管周围及腺体周边区小叶内纤维化，伴炎症细胞浸润，局部腺体萎缩。该模型的重复性好，成功率高，且TNBS价廉，但手术中需开腹进行胰管注射，手术有一定难度，且具有一定的创伤。 　　5 胰