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抗衰老片对衰老大鼠学习记忆及自由基代谢影响
抗衰老片对衰老大鼠学习记忆及自由基代谢影响
作者:陶涛 潘永明 冷晓霞 寿旗扬 朱科燕 谢日青 杨玉伟 陈民利
【摘要】 观察抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和脑自由基代谢的影响。[方法]取健康Wistar大鼠72只随机分为空白对照组、模型对照组、抗衰老片高、中、低剂量组、六味地黄丸组和首乌延寿片组。采用皮下注射D半乳糖100mg/kg,连续造模49天,建立大鼠衰老模型,各给药组在造模同时给予相应的药物,观察大鼠一般情况和体重变化,用水迷宫测试空间行为记忆能力,并测定脑组织自由基代谢SOD、MDA、GSHPx、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase、NO和TChE的变化。[结果]与空白对照组比,模型对照组体重增长率下降(Plt;0.01),脑组织中SOD、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase和GSHPx活力下降,MDA、NO和TChE均明显升高,水迷宫实验中探索路径和搜台潜伏期显著增加。给予不同剂量的抗衰老片、六味地黄丸和首乌延寿片后,能显著提高衰老大鼠体重的增长率,提高脑组织中SOD、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase和GSHPx活力,显著降低MDA、NO含量和TChE活性,缩短衰老大鼠在水迷宫实验的探索路径和搜台潜伏期。[结论]抗衰老片可改善衰老大鼠的学习记忆能力,增强记忆的功能,延缓自由基造成脑组织的脂质过氧化,抗衰老的作用机制可能与抑制体内脂质过氧化过程有关。
【关键词】 抗衰老片;学习记忆;自由基代谢;乙酰胆碱酯酶
Fund project:1.special research subject of TCM“Treat Predisease”in Zhejiang Province(No:2007WB022);2.Item supported by Training Project of Zhejiang Provincial Health HighLevel Creative Talents 本实验观察了抗衰老片对D半乳糖致衰老模型大鼠学习记忆和脑自由基代谢的变化,并以六味地黄丸和首乌延寿片为对照,探讨抗衰老片的药理作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 试验药物
抗衰老片(浸膏粉),棕褐色粉末,批号:080320,由正大青春宝药业有限公司提供;六味地黄丸,批号:707360,北京同仁堂科技发展股份有限公司产品;首乌延寿片,批号:A060801,上海和黄药业有限公司产品。
1.2 实验动物及饲养环境
SPF级Wistar大鼠,雌雄各半,体重:雌200~220g,雄240~260g,由中科院上海实验动物中心/上海斯莱克实验动物公司提供[SCXK(沪)2007-0005],饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障系统内[SYXK(浙)2003-0003]。
1.3 主要试剂
D半乳糖购自上海恒信化学试剂有限公司(原上海试剂二厂),批号考马斯亮兰蛋白,丙二醛(MDA),超氧化物岐化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx),一氧化氮(NO),ATP酶,乙酰胆碱酯酶(TChE)测试试剂盒均购于南京建成生物工程研究所,批号均
1.4 主要仪器
BT815A半自动生化分析仪(上海三科仪器有限公司);FJ200组织匀浆机(上海标本模型厂);Morris水迷宫(西班牙Panlab 公司)。
1.5 造模与给药
将大鼠购入适应性饲养1周后,观察有无异常情况,然后将大鼠称重,编号,按体重随机分组,分成7组,每组12只,雌雄各半,自由进食饮水。除空白对照组外,其余各组每天颈背部皮下注射D半乳糖生理盐水溶液,剂量为100mg/kg,连续造模49天,每天一次。从造模第1天开始给药,抗衰老片高、中、低剂量组分别灌胃给予0.60g/kg、0.30g/kg、0.15g/kg剂量的抗衰老片浸膏粉,六味地黄丸组和首乌延寿片组分别灌胃给予六味地黄丸0.68g/kg和0.525g/kg,模型对照组和空白对照组每天灌胃给予蒸馏水10ml/kg,连续给药49天。
1.6 观察指标
1.6.1 一般观察
每日观察大鼠毛色、尾巴、粪便、活动情况,称取体重。
1.6.2 水迷宫空间行为记忆能力测试
采用Morris水迷宫测试。水迷宫主要由一漆成暗灰色的圆柱形水池和一金属站台组成。水池高50cm,直径80cm,站台直径10.0cm。水池上方通过一数字摄像机与计算机监视屏相连接。大鼠在水池中的全部活动情况可在监视屏中看到,利用计算机软件对其活动进行全程跟踪,并显示整个活动轨迹。当设定的训练时间已到或动物已爬上站台,计算机停止跟踪并记录下游泳轨迹和自动计算出动物在水池
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