顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶反应体系地建立-.pdf

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顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶反应体系地建立-

顺乌头酸酶一异柠檬酸脱氢酶反应体系的建立幸 樊晶 刘娜 王晓华 李玉艳(天津市血液中心 300110) 摘要:目的对顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶进行酶促反应动力学研究,建立顺 乌头酸酶一异柠檬酸脱氢酶的反应体系。方法根据反应产物NADPH在340nln波长下 的吸光度与酶活性存在的正比关系,测定异柠檬酸脱氢酶和所建立反应体系的活性大 小。从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶.异柠檬酸脱氢酶反应体系,利用该 体系对铁离子的浓度进行检测。结果异柠檬酸脱氢酶催化反应的终产物随时间的增长 而增多,直至趋于稳定;从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶.异柠檬酸脱氢 酶反应体系,该体系可正常工作,当加入螯合剂去除铁离子,体系无活性;透析去除螯 合剂后,再向体系中加入足量铁离子,活性恢复。结论利用顺乌头酸酶一异柠檬酸脱 氢酶建立的反应体系,可有效检测铁离子浓度。 关键词:铁离子;顺乌头酸酶;异柠檬酸脱氢酶;反应体系 ofAconitase-IsocitrateReaction Construction DehydrogenaseSystem Abstract:Kineticsof reactionsofaconitaseandisocitrate enzyme.catalyzed hadbeenresearchedinthe alsoincludedthereaction dehydrogenase assay,which system constructedbvaconitaseandisocitrate NADPHofthereaction dehydrogenase.Because had relationwith ofthisreaction productproportional enzymeactivity,theactivity system be of outcomeNADPH coulddetected.Theresults asfollow:Theof experiment catalyzed isocitrate increased then atlastastime by dehydrogenasesharply,andstayedconstantly goes wereextractedfrom thenthereactionofaconitase by.Soluble liver,and proteins pork system andisocitrate wasconstructed。Thereaction work。肋enFez+ could dehydrogenase system lost to waseliminatedbv F一+Wasadded chelatingagent,reactionsystemactivity.If enzyme

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