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顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶反应体系地建立-
顺乌头酸酶一异柠檬酸脱氢酶反应体系的建立幸
樊晶 刘娜 王晓华 李玉艳(天津市血液中心 300110)
摘要:目的对顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶进行酶促反应动力学研究,建立顺
乌头酸酶一异柠檬酸脱氢酶的反应体系。方法根据反应产物NADPH在340nln波长下
的吸光度与酶活性存在的正比关系,测定异柠檬酸脱氢酶和所建立反应体系的活性大
小。从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶.异柠檬酸脱氢酶反应体系,利用该
体系对铁离子的浓度进行检测。结果异柠檬酸脱氢酶催化反应的终产物随时间的增长
而增多,直至趋于稳定;从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶.异柠檬酸脱氢
酶反应体系,该体系可正常工作,当加入螯合剂去除铁离子,体系无活性;透析去除螯
合剂后,再向体系中加入足量铁离子,活性恢复。结论利用顺乌头酸酶一异柠檬酸脱
氢酶建立的反应体系,可有效检测铁离子浓度。
关键词:铁离子;顺乌头酸酶;异柠檬酸脱氢酶;反应体系
ofAconitase-IsocitrateReaction
Construction DehydrogenaseSystem
Abstract:Kineticsof reactionsofaconitaseandisocitrate
enzyme.catalyzed
hadbeenresearchedinthe alsoincludedthereaction
dehydrogenase assay,which system
constructedbvaconitaseandisocitrate NADPHofthereaction
dehydrogenase.Because
had relationwith ofthisreaction
productproportional enzymeactivity,theactivity system
be of outcomeNADPH
coulddetected.Theresults asfollow:Theof
experiment catalyzed
isocitrate increased then atlastastime
by dehydrogenasesharply,andstayedconstantly goes
wereextractedfrom thenthereactionofaconitase
by.Soluble liver,and
proteins pork system
andisocitrate wasconstructed。Thereaction work。肋enFez+
could
dehydrogenase system
lost to
waseliminatedbv F一+Wasadded
chelatingagent,reactionsystemactivity.If enzyme
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