中华骨髓库CWD表2.2版本.pdf

中国常见及确认的HLA 等位基因表(CWD)2.2 版本 中华骨髓库CWD 表编撰组 2016-02-15 前言 自1958 年发现第一个人类白细胞抗原(HLA)A2 抗原以来，各国科学家多年来通过协作 和技术创新，极大推动了HLA 领域的发展和应用，在HLA 结构、功能、多态性、组织器官 移植应用、人类群体遗传和进化分析等方面取得了重大成就。目前HLA 分型技术已广泛应 用于多个领域，如造血干细胞捐献者建库、HLA 群体遗传多态性、HLA 生物学功能、实体器 官和造血干细胞移植供受者组织相容性配型、与某些疾病的关联、人类遗传进化、药物个 性化选择等方面。 HLA 系统具有高度遗传多态性，现发现的HLA 抗原共有165 个，其中HLA-A 位点有28 个、HLA-B 位点有62 个、HLA-C 位点有10 个、HLA-DR 位点有24 个、HLA-DQ 位点有9 个、 HLA-Dw 位点有26 个、HLA-DP 位点有6 个。根据IMGT/HLA 数据库3.23 版本（2016 年1 月 19 日发布），总共发现14232 个HLA 等位基因，其中HLA-A 位点为3356 个、HLA-B 位点为 4179 个、HLA-C 位点为2902 个、HLA-DRB1 位点为1860 个、HLA-DQB1 位点为900 个。 一、HLA 常见及确认等位基因表的提出 HLA 基因分型技术已得到广泛的应用，主要方法有PCR-SSP、PCR-SSO、Luminex 技术、 PCR-SBT 等。由于HLA 基因高度多态性和检测技术的限制，在检测特定座位的分型中存在模 棱两可的等位基因分型结果。模棱两可的基因型结果是指在HLA 基因分型过程中，标本指 定结果中存在一种以上的HLA 等位基因组合方式。 1、HLA 分型检测存在模棱两可的等位基因分型结果 随着HLA 等位基因数量的增加，等位基因间碱基序列高度同源性也越来越高，同一位 点不同等位基因之间碱基差异序列越来越少，造成检测区分难度相对增加；此外在测序过 程中存在多种等位基因组合在测序区域内具有相同的杂合序列，可导致HLA 基因分型时出 现模棱两可的基因型结果。 2、常见及确认等位基因表的提出 HLA 分型方法产生模棱两可结果后不能得到单一的HLA 分型结果，为解决这些模棱两可 的结果，国际上提出了多种方法，其中之一为常见及确认等位基因表原则。2007 年美国组 织相容和免疫遗传协会(ASHI)成立了一个特设委员会，提出常见及确认的等位基因表 （Common alleles and well documented alleles，CWD）。CWD 原则分型中将常见等位基 因和确认等位基因合并为CWD,当模棱两可的等位基因组合中出现CWD 等位基因需要进一步 区分，而出现罕见等位基因组合其临床分型中实际意义有限可予以排除，此表给临床HLA 高分辨分型检测及实验室评估提供了参考依据。 3、国际CWD 表指导HLA 高分辨分型和高分辨分型实验室的评估 3.1 美国ASHI/NMDP 对HLA 高分辨分型实验室的要求 ⑴如果实验室所报的结果以单一等位基因或者等位基因组(P组和G 组)的分辨率为主， 实验室将被授予HLA 高分辨分型实验室资格。⑵质控盲样分型结果必须至少有80%为高分辨 率分型结果。⑶为获得高分辨分型实验室的认证，高分辨分型实验室必须在前三个连续的 质控调查中高分辨分型结果至少要达到80%。 3.2 高分辨分型的定义和要求 ⑴高分辨分型必须是单一等位基因型的结果。 ⑵除特定的不表达等位基因外，实验室并不需要区分如下不同等位基因之间的差异。 ①在HLA- Ⅰ类基因中，等位基因的第2 和第3 外显子编码的氨基酸序列相同，而它们 的差异仅在于第2 和第3 外显子之外的碱基序列； ②在HLA- Ⅱ类基因中，等位基因的第2 外显子编码的氨基酸序列相同，而它们的差异 仅在于第2 外显子之外的碱基序列； ③这些信息应在目前的IMGT/HLA 数据库和CWD 表格中可查找到。 ④HLA- Ⅰ类基因的第2 和3 外显子，HLA- Ⅱ类基因的第2 外显子编码相应HLA 分子的 抗原识别部位（ARS），所以在表述中也可以用ARS 来替代HLA- Ⅰ类基因的第2 和3 外显 子，HLA- Ⅱ类基因的第2 外显子。 ⑶高