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湖北工业大学生物制药学多肽与蛋白质类药物
第四章
多肽与蛋白质类药物
多肽与蛋白质类药物多肽与蛋白质类药物
第一节 多肽及蛋白质类药物的生产方法
第二节第二节 多肽类药物多肽类药物
第三节第三节 蛋白类药物蛋白类药物
多肽与蛋白质类药物多肽与蛋白质类药物
第一节 多肽及蛋白质类药物的生产方法
11.蛋白质类药物的分离纯化蛋白质类药物的分离纯化
2.2.多肽与蛋白质的化学合成多肽与蛋白质的化学合成
3. 基因工程法
第二节 多肽类药物
第三节 蛋白类药物
多肽与蛋白质类药物多肽与蛋白质类药物
第一节 多肽及蛋白质类药物的生产方法
第二节第二节 多肽类药物多肽类药物
1.1.概述概述
2.主要多肽类药物
3.主要多肽类药物制备
第三节 蛋白类药物
多肽与蛋白质类药物多肽与蛋白质类药物
第一节 多肽及蛋白质类药物的生产方法
第二节第二节 多肽类药物多肽类药物
第三节第三节 蛋白类药物蛋白类药物
1.概述
2.主要蛋白质类药物的制备
蛋白质类药物的分离与纯化蛋白质类药物的分离与纯化
(一)材料选择
((二))蛋白质提纯的蛋白质提纯的一般方法般方法
((三三))蛋白质的分离和纯化蛋白质的分离和纯化
((四四))溶液中蛋白质浓度的测定溶液中蛋白质浓度的测定
(五)纯度检查
((一))材料选择材料选择
原料来源包括各种生物组织或细胞原料来源包括各种生物组织或细胞,如如
CHOCHO细胞细胞,昆虫细胞昆虫细胞,植物细胞植物细胞,酵母酵母,
大肠杆菌等。选择原料时应考虑来源丰富、
目的物含量高、成本低且易于提取的材料。
同时应考虑其种属、发育阶段、生物状态、
来源、解剖部位、生物技术产品的宿主菌
或细胞等因素的影响或细胞等因素的影响。
((一))材料选择材料选择
原核细胞
优点优点:背景清晰背景清晰;生长增殖快生长增殖快,培养基简单培养基简单,可可
高密度培养,可获得高浓度蛋白产物;可大规模
发酵生产,成本低廉。
缺点:蛋白多以无活性或者包涵体存在;起始序
列为列为NN--乙酰甲硫氨酸乙酰甲硫氨酸;;存在微量蛋白酶存在微量蛋白酶;;常有污常有污
染物内毒素,需通过纯化出去。
((一))材料选择材料选择
真核细胞
优点优点:产物往往可分泌于细胞外产物往往可分泌于细胞外;具备翻译后修具备翻译后修
饰系统,蛋白质的高级结构与天然蛋白较为一致。
缺点:所需费用高;技术难度更大;常应用永生
化的细胞系,需注意有污染潜在的致瘤DNA病毒
及逆转录病毒的可能及逆转录病毒的可能,必须通过有效的验证确保必须通过有效的验证确保
其安全性。
㈡㈡提取提取
是分离纯化的第一步,是将目的物从复杂
的的生物体系中转移到特定的人物体系中转移到特定的人工液相体系液相体系
中。提取的总要求是最大限度的把有效成
分提取出来分提取出来,,关键关键是溶剂的选择是溶剂的选择。。
选择标准:首先对制备物有最大的溶解度,
并在提取中尽可能减少并在提取中尽可能减少一些不必要的成分些不必要的成分。
㈢㈢蛋白质提纯的蛋白质提纯的一般方法般方法
11.根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质。
22 .根据蛋白质分子形状和大小不同来纯化蛋白质根据蛋白质分子形状和大小不同来纯化蛋白质。
㈢㈢蛋白质提纯的蛋白质提纯的一般方法般方法
3.根据溶解度的不同来纯化蛋白质。
4 .根据电离性质的不同来纯化蛋白质根据电离性质的不同来纯化蛋白质。
对蛋白质的离子交换层析对蛋白质的离子交换层析,一般多用离子交换纤维一般多用离子交换纤维
和以葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等
为骨架的离子交换剂,主要是取其具有较大的蛋白
质吸附容量,较高的流速和分辨率等优点。
㈢㈢蛋白质提纯的蛋白质提纯的一般方法般方法
5.根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质
亲和层析法亲和层析法
固相化金属亲和层析固相化金属亲和层析::干扰素干扰素、、胃肠道多肽胃肠道多肽
6.根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来
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