丹参毛状根诱导条件的优化-上海师范大学学报.PDF

( ) 第 3 6卷 第 2期 　　　　　　　　　　　　　　　 上海师范大学学报 自然科学版 Vol. 3 6 , No. 2 ( ) 2 0 0 7 年 4 月　　　　　　 　　　　　Journal of Shanghai Norm al Un iversity N atu ral Sciences 2 0 0 7 , Ap r . 丹参毛状根诱导条件的优化 1 1 1 1 周 　伟 , 姚倩雯 , 钱忠英 , 沈亚芳 , 1 2 1 1 刘园园 , 张 　磊 , 周根余 , 开国银 ( 1. 上海师范大学 生命与环境科学学院 , 上海 200234; 2. 第二军医大学 生药教研室 , 上海 200433) 摘 　要 : 以发根农杆菌 C58C1, A4 , R 160 1为试验菌株 ,叶片 、叶柄 、茎段为外植体 ,研究了菌液 ( ) 浓度 、共培养时间和乙酰丁香酮 A S 等因素对丹参毛状根转化频率的影响 ,并用 PCR 对诱导 出的毛状根进行了阳性鉴定. 试验结果表明:菌株和外植体类型对丹参毛状根诱导率存在着显 ( ) μ 著的差异 ;最佳共培养时间为 3 ～4 d, 乙酰丁香酮 A S 浓度为 400 mo l/L 有利于促进毛状根 的产生. 为进一步利用基因工程技术进行中药丹参的品质改良奠定了基础. 关键词 : 丹参 ;毛状根 ;诱导 中图分类号 : Q943. 2　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2007) 02 009306 ( ) 丹参 S a lvia m iltiorrh iza Bunge 为唇形科多年生草本植物 ,作为一种传统中药在我国沿用已久 ,始载 ( 于 《神农本草经 》. 其活性成分主要分为两大类 :即水溶性酚酸类化合物 丹酚酸 A、丹酚酸 B、紫草酸 、迷迭 ) ( ) [ 1 ] 香酸、原儿茶醛、丹参素等 和脂溶性二萜类化合物 丹参酮 I、丹参酮 ⅡA、隐丹参酮等 . 现代药理研究 发现 :丹参具有抗过敏 [ 2, 3 ] 、抗肿瘤 [ 4 ～5 ] 、抗动脉粥样硬化 、防治脑血栓 [ 6 ] 、保护肝脏和肾脏免受损伤 [ 7, 8 ] 等 作用 ,临床用途十分广泛. 但是 ,丹参生长周期长 ,在传统的栽培模式下又面临着品质严重退化等问题. 利 用基因工程的手段对各种丹参品系进行遗传改良是一条理想的途径. 目前 ,国内围绕丹参毛状根的研究工 作已有一些成果[ 9, 10 ] ,但是关于丹