磷脂酶C生物学特性及其在中耳胆脂瘤组织中异常表达.docVIP

磷脂酶C生物学特性及其在中耳胆脂瘤组织中异常表达 韩正理 张官萍 【摘要】磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PI－PLC)是磷酸肌醇信号转导途径中的一个关键酶。在哺乳动物中，已确认共有12种PI－PLC同工酶，根据其不同结构和调控机制分为5大类：β、γ、δ、ε和最新发现的ζ。不同亚型的结构、调控和组织分布各有差异。PI-PLC在调控细胞信号转导途径中的特性使其在中耳胆脂瘤组织的形成中发挥作用。本文综述了PI－PLC家族5种亚型的结构、调控机制及其在中耳胆脂瘤组织异常表达的相关内容，并进一步探讨了PI-PLC-γ1信号转导机制在胆脂瘤形成中可能的具体作用。 【关键词】磷脂酶C（Phospholipase C）；信号转导（Signal transduction）；胆脂瘤（Cholesteatoma） 磷酸肌醇特异性磷脂酶C(phosphoinositide-specific phospholipase C, PI－PLC)是磷酸肌醇信号转导途径中的一个关键酶，当机体内激素、神经递质、生长因子等分子激活其受体时，导致PI-PLC水解磷脂酰肌醇－4,5－二磷酸(PIP2)产生两个重要的第二信使：三磷酸纤维醇（inositol triphosphate,IP3）和甘油二脂(diacylglycerol, DAG)，能使超过100种不同的细胞表面受体活化。IP3引起胞内Ca2+运动，DAG则活化蛋白激酶C（protein kinase C,PKC），通过信号转导和转录调控作用，涉及到许多蛋白组分的磷酸化，从而对细胞生长、分化、转换起到重要的作用。近年越来越多的研究表明，磷脂酶C在中耳继发性胆脂瘤各组织不同层面中的表达存在差异，在胞膜内外信号转导过程中的意义越来越受到人们的关注。 【PI－PLC家族】 PI-PLC分子为单链结构，每组PI－PLC同工酶包括保守结构域和不同亚型间特殊结构域。保守结构域包括C2结构域、EF手型结构域、PH结构域和两个高度保守的催化结构域（X区和Y区）组成。C2结构域为位于Y结构羧基末端下游部分，含120氨基酸残基，其功能主要是与Ca2结合（PI－PLC-δ）、识别、调控（PI-PLC－γ、δ）、被G蛋白亚基激活（PI-PLC－β）有关。EF手型结构域位于PH、X区之间，含有特定的螺旋－环－螺旋结构(1)，可牢固、特异型结合Ca2+ ,为向下游传递信号打好基础。PH结构域位于PI－PLC的氨基末端，约含100个氨基酸残基，可能具有将信号蛋白连接到膜表面作用，但在最新研究发现PI－PLC－ζ(2)中未发现PH结构域。PI－PLC的催化结构域，也就是X区和Y区，各含有170个和260个氨基酸残基。不同亚型间X、Y区的序列同源性为33%-43%,同一亚型间同源性高达79％，组成催发中心。PI－PLC同一亚型的磷脂酶有其特殊的功能结构域，如PI－PLC－β在Y区结构域下游有较长的尾序列，而此序列在PI－PLC－γ、PI－PLC-δ亚型是极短的，甚至有时是不存在的。PI－PLC－γ亚型包括另一PH结构域，被SH结构域分成两半。PI－PLC－ε的结构比较特殊，含有选择性剪接序列。最新发现的PI－PLC－ζ是PI-PLC家族中最短的1种亚型，其结构特点是缺少PH结构域(2)。 【PI- PLC同工酶】 在哺乳动物中，已确认共有12种PI－PLC同工酶，根据其不同结构和调控机制分为5大类：β、γ、δ、ε和最新发现的ζ(2)。PI－PLC-β有β1-β4 共4种亚型，PI-PLC-γ有γ1-γ2两种亚型，PI-PLC-δ有δ１－δ4 共4种亚型(3)。PI-PLC家族不同亚型间的结构不同，从而启动不同的调控机制，实现其在信号转导通路中复杂、精细、各异的调控功能。PI-PLC－β通过与G蛋白偶联而被激活；PI-PLC－γ亚型的调控与蛋白酪氨酸有关，特异性识别含SH2结构域的蛋白质，并将蛋白质序列中酪氨酸磷酸化；PI-PLC-δ亚型调控机制尚不明确，但它是PI-PLC家族中对Ca2+最为敏感的亚型；PI-PLC-ε亚型主要受G蛋白家族G12与Ras调控，这与它特殊的Ras-GEF、RA结构密切相关；新发现的PI-PLC-ζ的作用与产生IP3和Ca2+振荡有关，其具体调节机制尚不清楚。 PI－PLC－β： PI－PLC－β共有β1-β4四种亚型。β1亚型基因定位于20p12, β2亚型基因定位于15q15, β3亚型基因定位于11q13, β4亚型基因定位于20p12。PI－PLC－β多分布于神经系统，在其羧基端都含有较高比例的基本残基，特定关键区域允许这些同工酶进行核定位(4)。研究者们对PI-PLC家族的同工酶进行了连贯性研究发现：最清楚的就是PI-PLC－β1，它含有两个剪接变体:1a和1b，前者平均的分布于核和胞膜(5),而后者只