专题七：核基质及结构与组成.ppt

专题七：核基质的结构与组成 肖尚英 医学生物化学与分子生物学研究所 xiaoshy@lzu.edu.cn 一、细 胞 核 简 介 细胞核是细胞进化的里程碑，它是发现最早、认识最少的细胞器。1674年发现，1831年定名，认识逐步深入，但仍有许多谜团。 细胞核是细胞遗传信息（DNA）的贮存、复制和转录的主要场所；真核生物都有一个形态完整，有核膜包裹的细胞核，对细胞的生长、发育、繁殖和遗传、变异起着决定性的作用。 细胞核由核被膜、染色质、核仁和核基质 组成（图7-1）。 图7-1：真核生物细胞核结构示意图 在真核细胞核内除染色质、核膜与核仁外，还有一个以非组蛋白为主的网架结构体系。 这一网架结构体系最初是由Berezney和Coffey于1974年研究大鼠肝细胞核亚微结构时发现的，并首次将之命名为核基质(nuclear matrix)。 核基质是指真核细胞的细胞核依次去除膜脂、可溶性蛋白及染色质后所残留下来的以非组蛋白为主的网架结构； 包括核纤层、内部纤维-颗粒状网架结构体系(the inner fibrogranular network)和核仁基质等三部分。 核基质主要成分除非组蛋白外，还含有少量的RNA和DNA。 核基质蛋白具有组织、细胞特异性，大量研究表明核基质不仅在维持细胞核的形态结构；而且在染色质/染色体构建、DNA复制、基因表达调控和DNA的损伤修复等细胞生命活动中起重要作用。 （一）核被膜： 核被膜是内膜系统一部分，由核膜、核孔复合体和核纤层组成，其上有许多核膜孔。核膜孔是细胞核与细胞质进行物质交换的选择性通道。 核膜由两层膜组成，两膜中间叫核周间隙。核纤层位于核膜内侧，成分为核纤层蛋白。核被膜是控制物质、信息交流的脂双层膜结构，分隔核与质，构成核、质之间的天然选择性屏障（图7-2）。 核被膜可避免生命活动的彼此干扰，保护DNA不受细胞骨架运动所产生的机械力的损伤。 图7-2：核被膜结构示意图 核被膜在细胞有丝分裂中有规律地解体与重建，新核膜来自旧核膜。核被膜的去组装是非随机的，具有区域特异性（domain-specific）。以非洲爪蟾的卵提取物为基础的非细胞核装配体系提供了实验模型。 核被膜的解体与重建的动态变化受细胞周期调控因子的调节，调节作用可能与核纤层蛋白、核孔复合体蛋白的磷酸化与去磷酸化修饰有关。 1、核膜 （nuclear membrane） 由内外两层单位膜构成，核周间隙（20-40 nm）充满液态物质； 核外膜的表面附着核糖体，可与RER相连； 核内膜的内侧有致密纤维蛋白层（核纤层）的特异蛋白与核纤层相连，稳定核外形。 2、核孔复合体（nuclear pore complex，NPC） 核孔是由核膜内外层局部融合形成，3000-4000个/细胞。 核孔复合体结构模型称为fish-trap模型（图7-3）。 核孔复合体主要由蛋白质构成，其总相对分子质量约为1-5×106，推测可能含有100余种不同的多肽，共1000多个蛋白质分子。 如：gp210是一种结构性跨膜蛋白，介导核孔复合体与核被膜的连接，将核孔复合体锚定在“孔膜区”，从而为核孔复合体装配提供一个起始位点； p62是一种功能性的核孔复合体蛋白，具有两个功能结构域，可能在核孔复合体功能活动中直接参与核质交换。 核孔复合体的功能： 核质与胞质间物质交换通道具有双向选择性； 离子和水溶性小分子通过自由扩散出入，核蛋白运进（具核定位信号NLS）、RNA和RNP颗粒、核糖体亚基等物质的通过主动运输运出。 3、核纤层（Nuclear lamina） 内核膜内表面有一层电子密度高的蛋白质网络结构，称为核纤层（厚度为10-20 nm），其化学成分为中间纤维。切面观呈片层结构，整体观为球形网络。构成核纤层中间纤维的蛋白有3种：分别称：lamin A、lamin B、 lamin C。分子量在60-75 kD之间（图7-4）。 图7-4：核纤层结构示意图 一般认为核纤层为核膜与染色质提供了结构支架，并介导核膜及染色质之间的相互作用。 如：①维持核孔的位置和在有丝分裂间期对细胞核膜起支撑作用以维持核被膜的形状； ②为间期染色质提供锚定位点，为分裂期染色体提供构建附着的位点，介导核膜与染色质之间的相互作用； ③与在分裂期调控核膜的解离和重新装配有关。 在有丝分裂间期细胞核是分区的，每条染色体在核中各自占据一定的区域，有特定的位置，染色体相对分隔的位置是通过染色体上特异位点附着于内层核膜（核纤层）来维持的。 核纤层存在于内核模和染色质之间，是核形的决定性因素，与细胞核的各种功能相关，包括DNA复制，RNA转录，细胞核和染色质构建，细胞周期调节，细胞发育和分化，凋亡等。 新近的研究还表明，核纤层基因的突变可引起多种遗传病。 核纤层蛋白(Lamin)