脑苷肌肽治疗脑外伤实验研究-四环医药.pdf

脑苷肌肽注射液对大鼠脑外 伤神经保护作用研究 西南医院 实验方案设计 雄性SD大鼠TBI模型 n=306 死亡率评估 神经功能评价 BBB功能评价 病理形态学观察 m 学 脑 伊 H 小动物7.0T N 习 含 文 E 核磁共振 N 记 水 思 染 忆 量 蓝 S 能 染 色 力 色 Morris水迷宫 干湿重法 活体成像 Image J 分析 脑外伤模型的建立 大鼠脑外伤模型采用改进后的 Feeney 自由落体脑损伤装置。 水合氯醛麻醉大鼠，固定于立体定向仪上，头皮剪 毛，矢状切开头皮，剥离显露右顶颅骨，于中线左侧旁 约2. 5mm、前囱后约2. 5mm处用大鼠颅骨钻小心钻开颅 骨，保护硬膜完整，开骨窗3mm*3mm 。应用自由落体 打击器( 下端直径2mm 控制下陷深度2mm ) 打击硬膜， 造成右脑脑挫伤。撞击后,大鼠出现短暂的四肢抽搐、呼 吸暂停数秒，表明致伤成功。最后缝合鼠头皮( 落体致 2 伤的冲击力为20*40g/cm ) 。 实验分组  Sham组（n=45）：大鼠麻醉后固定于立体定向仪上， 头皮剪毛，矢状切开头皮，剥离显露右顶颅骨，但不进 行打击损伤。  Control组（n=46）：大鼠麻醉后固定于立体定向仪上， 头皮剪毛，矢状切开头皮，剥离显露右顶颅骨，颅骨钻 孔后进行自由落体打击损伤。  Low Dose组（n=47）：脑外伤+脑苷肌肽（0.2ml/kg）  middle Dose组（n=48）：脑外伤+脑苷肌肽（0.6ml/kg）  High Dose组（n=52）：脑外伤+脑苷肌肽（1.8ml/kg） 实验时间轴 7、14、28天三个时间点每组各取12只处死，进行 Evans Blue （n=6）and Brain Water Content Test （n=6）；并于该三个时间点处死大鼠后进行做石蜡切 片[Sham组（n=9）、Control组（n=10) 、Low组 TBI or sham operation (n=11）、Middle组（n=12）、High组（n=16） Day 0 Day 3 Day 7 Day 14 Day 21 Day 28 术后每日给药直至处死。并于3、7、14、28天行mNSS测试，于 7、14、28天行MRI检查，于21天至26天行Morris Water Maze 测试。 （n=6） （n=6） （n=6） Sham 组 （n=6） （n=6）