免疫复合物解离剂的研究及在HCV抗原检测中的应用效果分析_杨蓉.pdfVIP

DOI:10.13431/ki.immunol.j 免疫学杂志 年 月 第 卷 第 期 · · 2012 7 28 7 IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol. 28 No. 7 Jul. 2012 620 文章编号 （ ） ·论 著· [ ] 1000-8861 2012 07-0620-04 免疫复合物解离剂的研究及在HCV 抗原检测中的应用效果分析 杨 蓉, 龙润乡, 李 华, 谭振国, 白惠珠, 杨 婷, 蒋蕊鞠, 谢忠平* 摘 要 目的 方法 [ ] 探索一种可以使免疫复合物发生解离的方法，并进行应用效果分析。 通过对HAV 抗原抗体复合物的解 离，进行酸化剂、去垢剂的组合及解离时间、温度等相关条件筛选，优化出最佳的解离方法，应用于1 370 份HCV 血清样品，对解离 结果 前后的抗原阳性率进行统计分析。 160 EU/ml 的HAV 抗原能被效价为20 U/ml 的HAV 抗血清完全中和；只单独使用去垢剂 对免疫复合物无解离效果；0.1 mol/LGly-HCL 能解离抗原抗体复合物，加入1 种或几种去垢剂后则其解离效果有不同程度的提高， 其中以Gly-HCl+7% TritonX-100+5% CHAP 的效果最好（q=27.177 ，P ＜ 0.01）；免疫复合物在加入解离剂后在室温60 min 、 37 ℃ 30 min、60 ℃ 10 min 为本试验较好的解离条件，其中以37 ℃ 30 min 效果最佳；应用Gly-HCl+5% CHAPS+7% TritonX-100 在37 ℃对样品进行预处理30 min 后，可使HCV 抗原阳性检出率由解离前的33.3%提升至75.56%，解离前后之间的阳性率差异具 有显著地统计学意义（χ2 = 32.34，P 0.01）。结论 酸化剂能将HAV 及HCV 抗原抗体免疫复合物解离，添加去垢剂后，解离效果好 于单独使用酸化剂，且联合添加好于单独添加。 [关键词] 甲型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；抗原抗体复合物；解离；抗原检测 [中图分类号] R392-33 [文献标识码] A Investigation of immune complex dissociation reagents and their appli- cation in detecting HCV antigen YANG Rong, LONG Runxiang, LI Hua, TAN Zhenguo, BAI Huizhu, YANG Ting, JIANG Ruiju, XIE Zhongping Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Kunming 650118, China [Abstract] Antigen is one of infectious markers prior to antibody. Antigen test has been proven to be able to remedy loss of detection in window period ca