用胞质分裂阻断法建立淋巴细胞微核率的剂量效应曲线.pdfVIP

遗传～少 丝EDITAS(Beijing)，；(2):29-311992 用胞质分裂阻断法建立淋巴细胞 微核率的剂量效应曲线 关树荣 白玉书 黄绮龙 柴 文 （卫生部工业卫生实验所，北京，100088) 本文采用胞质分裂阻断微核法建立 。oL+。二线照射离体人血诱发微核的剂量效应关系曲线，结果在 0.1-5.OGy范围内呈良好的剂量效应关系。对回归方程式的回归系数和曲线拟合度进行了显袭性检 验，表明微核细胞率和微核率昏适于拟合二次多项式 Y（，。十bD＋ 护‘），同时对加Cyt-B的浓度 和时间以及终止培养时间进行了讨论。 关镇词：CO，射线，剂量效应曲线，胞质分裂阻断微核法，松胞素-B 淋巴细抱微核率作为估算辐射剂量的辅助 生牛血清，青、链霉素各 10016,/ml,PH值为 指标，已受到广泛重视，并已有实际应用的报 7.2,PHA适量）摇匀，置于37℃恒温箱中培 道[41。 但以往采用的常规培养法国不能识别出 养。到40小时加松胞素-B (Cytchalasin-B, 第一次有丝分裂的淋巴细胞。1985年，Feneci! Cyt-B)。事先将其溶于二甲基亚矾中D（MSO), 和Morle尹，提出了胞质分裂阻断微核法 一20℃冻存，用前融化，生理盐水稀释，最终浓 (Cytokinesis-blockMicronucleusMethod,CB 度为6ug/ml,摇匀，继续培养到72小时。 微核法）克服了这些不足，提高了微核检测的准 终止培养后，首先除去上倩，然后加入 确性。本文采用CB法建立了 “cor线诱发淋 0.075mo1/LKCl4m1,并混匀移到离心管中， 巴细胞微核率的刻量效应曲线。以便在放射事 立即加新配的固定液 （甲醇：冰乙酸--3:1)4m1, 故条件下，用其估算电离辐射的生物剂量。 混匀后，以1000转／分离心 10分钟，然后去 上清，再重复固定一次，沉淀物滴片，Giemsa 材 料 和 方 法 染色。 一（）血样和照射条件 采用盲法阅片，只观察双核淋巴细胞 双（核 无菌条件下抽取两名健康青年男性静脉血 CB细胞）并记录其微核。微核判断标准[2.s1是 各20ml，肝素抗凝，混匀。将每份血样分别注 必须与主核分开，如有重叠或相切应清楚的看 人灭菌的10支玻璃试管内。将标本置于37士 到各自的核膜。结构与主核相同，着色与主核 0.5℃有机玻璃恒温水浴箱中，”℃。Y线一次照 一致或略浅，大小为主核的I23以下。结果以 射，照射剂量为0,0.1,0.2,0.3,0.5,1,2,3,4,， 微核细胞率 痴（）和微核率 （1100）表示。 Gy，共10个剂量点，剂量率为0.3805Gy/min, 三（）统计分析方法w 二（）培并制片和观察 GaanShurongesal.:TheUseofCytokinesis- 受照血样在37℃恒温箱内放置90分钟后 block M icronucleusMethod toEstablish Curves 再进行培养。将各管血样分别注人已配好的培 ofRelarionsbipsbetween Radiation Doseand MicronucleusFrequenciesinHumanLymphocytes 养液内 （培养液内为8051oRPMI1640,201loZr 本文于 1990年12月 10日收到a ．29 ． 微核细胞本符合二项式分布，将所得结果 。＋LD＋