植物细胞骨架研究中的共聚焦显微镜技术-中国显微图像网.PDFVIP

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2018-08-17 发布于天津
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激光扫描共聚焦显微镜植物细胞骨架研究中的共聚焦显微镜技术中国农业大学生物学院植物生理学与生物化学国家重点实验室袁明普通荧光显微镜与共聚焦显微镜的比较植物细胞中微管（microtubules ）的共聚焦显微镜观察共聚焦显微镜的优势：免疫荧光 1、较少的荧光干扰（高反差图像）荧光蛋白 2、较高的灵敏度和分辨率 3 、可形成三维图像 4、对细胞的损伤较小植物细胞中微管的免疫荧光观察植物细胞中的微管列阵(microtubule array) 植物细胞中微管的免疫荧光观察 • 细胞的固定早前期周质微管微管带 • 细胞壁和细胞膜的增透 • 抗体的选择 • 共聚焦显微镜的观察纺锤体成膜体 1 活体细胞中微管的观察微管与微管结合蛋白的结合和定位微管的聚合和解聚微管 MAP18 标记微管蛋白 • 微管蛋白的荧光标记 • 荧光微管蛋白的显微注射 • 共聚焦显微镜观察荧光微管蛋白在活体植物细胞中组装进微管的过程周质微管列阵的取向变化紫露草雄蕊毛细胞中的微管玉米胚芽鞘表皮细胞中的微管间期植物细胞周质微管列阵的取向 2 微管列阵取向变化的实时观察微管列阵取向变化的实时观察活体植物细胞中周质微管列阵的重新取向活体植物细胞中周质微管列阵的重新取向微管列阵的三维结构分析微管列阵的三维结构分析植物细胞四个侧面上周质微管的取向，形成螺旋排列周质微管重新取向的非同步性光漂白恢复法绿色荧光蛋白（GFP ）的应用 • GFP和骨架蛋白（微管蛋白或肌动蛋白）的融合蛋白 • GFP和骨架结合蛋白的融合蛋白间期植物微管的快速周转（turnover ）