紫外-可见分光光度法 (2).pptVIP

第十章　紫外－可见分光光度法（UV-vis） 有机化合物的吸收光谱主要由σ→σ*、 π→π*、 n→σ*、n→π* 及电荷迁移跃迁产生的。 无机化合物的吸收光谱主要由电荷迁移跃迁和配位场跃迁产生。 跃迁类型 能在紫外光区产生吸收的有机 化合物：不饱和且具有共轭系统 B带和E带 苯的B带吸收光谱 苯乙酮的紫外吸收光谱 四、影响吸收带的因素 位阻影响 跨环效应 溶剂效应 pH影响 ?位阻影响 溶剂效应 讨论： 1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光 溶液是稀溶液 2．该定律适用于固体、液体和气体样品 3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定 2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数ε： 在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度 2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数： 在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度 3）两者关系 3．吸收光谱（吸收曲线）：λ~A 二、分光光度计的类型 （一）单光束分光光度计 （三）双波长分光光度计 一个光源，两个单色器，一个吸收池 第三节 紫外-可见分光光度分析法 一、定性分析 二、定量分析 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） UV-vis定量分析方法 单组分的定量方法 吸光系数法 UV-vis单组分定量分析方法：吸光系数法（例题） 校正/标准/工作曲线法 对照法（外标一点法） 多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 首先在 ?2 处测定b组分，因a组分不干扰 A sb= E?2b C s bL E?2b= A sb/C sbL 在?2处 A xb= E?2b C xbL 求出C xb A?1a+b = A?1a + A?1b = E?1 a Cxa L+ E?1 b CxbL 其中： E?1a= A ?1a/C s a L E?1b= A ?1b/C s b L 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 用双波长法 （解线性方程组法） 4．双波长法 步骤： 消除a的影响测b 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 五、结构分析 （二）、有机化合物结构的研究 有机化合物分子结构研究 推断官能团（可能性） 推断构型和构象 顺反异构体 推断化合物骨架 六、比色法 比色法：对于能吸收可见光的有色溶液的测定方法， 成为可见分光光度法。 单色器 ? 同步旋转镜 单色器 参比 样品 检测器 显示器 斩光器 光源 （二）双光束分光光度计 双光束分光光度计 可自动扫描吸收光谱； 自动消除光源强度变化带来的误差 单波长双光束分光光度计 比值 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 光束分裂器 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵 敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂， 价格较高。 光源 单色器Ⅰ 单色器Ⅱ 吸收池 检测器 ?1 ?2 斩光器 用两种不同波长的单色光束交替照射到样品溶液上，不需使用参比溶液，测得的是样品在两种波长下的吸光度之差 双波长分光光度计 双波长分光光度计 结构特点 两个 单色器 不需要 参比溶液 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量 2）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 >> 主成分吸收→与纯品比较，E↑， 光谱变形 单组分定量分析方法 多组分定量分析方法 单组分的定量方法 吸光系数法 校正曲线法 对照法 适用：单色光较纯，符合Beer定律 方法： 绝对法： 比较法： ? 例1:VB12 ?max 361nm:E1%1cm=207, A=0.414, l=1cm，求C=？ g/100ml 例2:样品V