周期性张应力联合淫羊藿苷促进脂肪干细胞成骨分化的实验研究.pdfVIP

!!!!!!!塑坚鲤垒些些i!!!竺!!型!!!!，!!!：!!!!!! 5· ±堡塑堡匡堂量壁复苤查!!!!生!旦笙!!鲞笪!塑 ．基础研究． 周期性张应力联合淫羊藿苷促进脂肪干细胞 成骨分化的实验研究 叶亚平 李娜 向威 王锐 郭风劲 许涛 【摘要】 目的探讨周期性张应力(CTS)联合淫羊藿苷促进脂肪干细胞(ASCs)成骨分化的作用。方 法 用普通培养基于预)、淫羊藿苷组(仅用淫羊藿苷干预)、1000“组(仅用1000斗的CTS干预)、2000¨组(仅用 行干预)。淫羊藿苷的作用浓度为10mol／L；CTS的设置参数为频率1．0Hz，应力大小分别为1000斗strain s之后休息15 h。干预7d后，收获细胞采用 (简称1000斗)、2000斗、3000¨，每刺激5s，每口总刺激时间为2 Western d后， Blot法检测碱性磷酸酶(ALP)蛋白的表达；用淫羊藿苷联合2000斗的CTS对ASCs进行干预3 收获ASCs细胞用WesternBlot法检测具Runt相关基因转录因子2(Runx2)、YES相关蛋白(YAP)和结缔组织 d和7 生长因子(CTGF)蛋白的表达；分别于干预3d后，采用ALP活|生定量检测试剂盒对ALP活性进行检 d 测；干预3d后，利用RT．PCR检测YAP下游靶基因CTGF和锚蛋白重复结构域1(Ankrdl)的表达；干预7 后，利用RT．PCR检测成骨分化相关基因骨桥素(OPN)和I型胶原的表达，并对各组所得数据进行统计学分 析比较。结果 淫羊藿苷和CTS(1000肛、2000肛、3000斗)均能硅著促进ALP蛋白的表达。与1000斗和 3000¨应力大小的CTS相比，2000¨的CTS具有最强的促ALP蛋白表达能力；且2000灿的CTS联合淫羊藿 苷能显著促进ALP的表达及Runx2和CTGF的表达，且其联合作用时效应更明最；但淫羊藿苷和2000斗的 CTS单独作用并不能促进YAP蛋白的表达，只有联合作用时才具有促YAP表达作用。淫羊藿苷和2000IX的 d和7d后均能显著上调ALP的活性，且其联合作用时上洌ALP活性的效应更加明显。淫羊 CTS单独作用3 藿苷和2000“的CTS单独作用7d后，能显著促进成骨分化基因OPN和I型胶原蛋白的表达，且联合作用时 d后能显著促进YAP靶基因CTGF和Ankrdl的表达，联 效应更明显。淫羊藿苷和2000“的CTS单独作用3 合作用时效应更明显。结论 CTS和淫羊藿苷联合作用可以通过上调YAP活性来促进ASCs的成骨分化。 【关键词】 淫羊藿苷；周期性张应力；脂肪干细胞；成骨分化 基金项目：国家自然科学基金面上项目(8137】915) tensilestraincombinedwithicariin the differentiationof stem Cyclic promotesosteogenic adipose-derived lie Hos’ cells Wet，WangRui，GunFengjing，XuTan．+Department矿Orthopedics，Tongji Yaping。，“Na，Xiang Medical Scienceand 430030，China Universityof Technology，Wuhan pital，TongiiCollege，Huazhong author