猪脂肪基质细胞成骨与成脂分化潜能的研究3.pdfVIP

中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2005, 25 ( 11) : 37 ～40 猪脂肪基质细胞成骨与成脂分化潜能的研究 屈长青 　张国华 　赵丽丽 　杨公社 (西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室 　杨凌 　7 12 100) 摘要 　目的:探索猪脂肪基质细胞体外培养和向成骨与脂肪细胞分化的条件 。方法 :常规方法培 ( 养猪脂肪基质细胞 ,分别向成骨细胞与脂肪细胞进行诱导 ,应用免疫组化 碱性磷酸酶法 、茜素 ) 红 及油红 O 染色对诱导分化的细胞进行鉴定 。结果 :在体外培养条件下 ,猪的脂肪基质细胞呈 成纤维样 ,生长旺盛 ,在一定的条件下 ,可分别被诱导分化为成骨细胞与脂肪细胞 , 向成骨分化的 细胞表达碱性磷酸酶 ,在培养皿中可形成钙化斑 。而在向脂肪细胞诱导分化过程中 ,细胞中可见 有小脂滴生成 ,用油红 O 染色呈橘红色 。结论 :脂肪基质细胞是一种混合细胞 , 除了能向脂肪细 胞分化外 ,在一定的诱导条件下 ,也能向成骨细胞分化 。 关键词 　猪 　脂肪基质细胞 　成骨细胞 　脂肪细胞 　　脂肪组织和脂肪细胞是近年来人们广泛探索的领 1　材料与方法 域之一 。这主要有两个原因:首先 ,越来越多的研究表 明脂肪组织不仅仅是被动的能量库 ,而且其能分泌多 1. 1　材 　料 种激素类物质 , 通过 内分泌 、旁分泌途径发挥调控作 1. 1. 1　脂肪组织 　杨凌农校种猪场 1～3 日龄仔猪 ,取 用 ;其次 , 200 1年 , Zuk 等 [ 1 ] 从人抽脂术中抽取的脂肪 材部位位于颈部和肩胛部皮下 。 组织悬液中第一次分离获得了具有多向分化潜能的细 1. 1. 2 　主要试 剂 　DM EM 培养基 和 Ⅰ型胶 原酶 胞 ,命名为 PLA ( p rocessed lipoasp irate ) 细胞 。它能分 ( ) β GIBCO 公司 ; 地塞米松 、抗坏血酸和 甘油磷酸钠 化为脂肪细胞 、软骨细胞 、成骨细胞和成肌细胞 。由于 ( ) ( Sigm a公司 ;胎牛血清 中美合资兰州民海生物工程 获取脂肪组织要比骨髓容易 ,而且把原本认为是多余 ) ( ) 有限公司 ;牛血清白蛋白 Am ersco 公司 ;碱性磷酸酶 ( ) 的废弃物 抽取的脂肪组织悬液 变为干细胞库的重要 ( ) 试剂盒 南京建成生物工程研究所 。 来源 ,这本身就具有极大的经济与社会效益 , 因此虽然 1. 2　方 　法 发现较晚 , 但研究非常迅速与深入 。目前 已证实 , 从 1. 2. 1　猪脂肪基质细胞的获得 　无菌状态下取仔猪 人 、鼠及兔子等不同动物体 内的脂肪组织中都能获得 ( ) 颈部脂肪组织 ,用含高浓度青霉素 300U /m l 和链霉素 脂肪组织来源干细胞 , 并能向脂肪细胞